查看: 648  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

18341841548

新虫 (小有名气)


已领完
求助
领取红包 (小木虫手机app专属红包)

扫一扫,下载小木虫客户端

我想问大家一下,我现在做蛋白纯化,细胞破壁液是有活性的,并且很大,现在纯化的蛋白没有活性,考虑是咪唑抑制酶活,但是我超滤除去咪唑,顺带浓缩,酶活有了一点点,但是很小,请问大家知道什么原因嘛?哪里除了问题?非常感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

applesz

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by 18341841548 at 2019-03-16 09:41:44
首先SDS_PAGE检测纯化的蛋白浓度还是挺大的,我确实是在室温下纯化的,如果蛋白胶图纯化蛋白浓度挺大,这种情况也要考虑温度的原因导致失活嘛?我自己认为应该不会这么快
...

酶失去活性与蛋白浓度没有太大的关联吧,酶活中心结构发生变化也有可能会导致酶失活吧。个人觉得温度是一个可能的因素,温度不同,可能酶所处的构象不一样,但不知道会不会适合你的体系,纯化的时候加点蛋白酶抑制剂。

发自小木虫Android客户端
9楼2019-03-16 11:23:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

applesz

新虫 (小有名气)


7楼2019-03-16 09:35:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18341841548

新虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by applesz at 2019-03-16 09:35:18
纯化温度过高?

首先SDS_PAGE检测纯化的蛋白浓度还是挺大的,我确实是在室温下纯化的,如果蛋白胶图纯化蛋白浓度挺大,这种情况也要考虑温度的原因导致失活嘛?我自己认为应该不会这么快

发自小木虫Android客户端
8楼2019-03-16 09:41:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18341841548

新虫 (小有名气)


引用回帖:
9楼: Originally posted by applesz at 2019-03-16 11:23:20
酶失去活性与蛋白浓度没有太大的关联吧,酶活中心结构发生变化也有可能会导致酶失活吧。个人觉得温度是一个可能的因素,温度不同,可能酶所处的构象不一样,但不知道会不会适合你的体系,纯化的时候加点蛋白酶抑制 ...

好的  非常感谢您的建议 第一次接触这方面实验  很多细节想不到  但是我的出发点 必须这个酶得有活性

发自小木虫Android客户端
10楼2019-03-16 13:46:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
8219524664楼
2019-03-16 09:30   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
2019-03-16 09:23   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫IOS客户端
2019-03-16 09:32   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
2019-03-16 09:31   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
zfpd27663楼
2019-03-16 09:29   回复  
18341841548(金币+1): 谢谢参与
已获得1个金币 发自小木虫Android客户端
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 科研好难啊,想退学去打工。 +19 byywnyl 2024-04-27 21/1050 2024-04-29 00:50 by 理科生yes
[论文投稿] LWT投 +4 AChen92 2024-04-26 4/200 2024-04-28 22:26 by hapyia2100
[找工作] 普通院校药学硕士,做合成的,感觉找不到工作 +15 pom戴墨镜 2024-04-24 26/1300 2024-04-28 22:26 by saenpe
[考博] 博士招生-211农业院校 +6 NYC917 2024-04-26 12/600 2024-04-28 21:51 by NYC917
[教师之家] 博士论文被抄袭 +28 和尚敲小木鱼 2024-04-22 45/2250 2024-04-28 21:50 by tingquan2011
[考博] 申博成果界定是根据Jcr分区还是中科院分区 +6 我属驴核动力驴 2024-04-22 7/350 2024-04-28 20:21 by J584326
[基金申请] 部委直属研究所(非北京市属单位)报北自然青年基金中的概率会不会很小,有必要报吗? 5+3 拓芙 2024-04-26 4/200 2024-04-28 18:18 by bjdlqz
[论文投稿] with editor 两个月了,什么原因? +9 yiersan9 2024-04-24 22/1100 2024-04-28 17:12 by ds521chun
[考博] 真的好想读博! +17 wangzhe_bs 2024-04-22 25/1250 2024-04-28 17:10 by wangzhe_bs
[论文投稿] Jounal of Ethnopharmacology投稿 +3 lay木子禾 2024-04-25 4/200 2024-04-28 16:58 by hanyunch
[有机交流] 以2氟甲苯为原料做2氟4溴甲苯 +3 高树桩 2024-04-24 7/350 2024-04-28 14:37 by 高树桩
[教师之家] 大学直属学院卸任的副院长退休后还享受副处级的养老待遇吗? +6 苏东坡二世 2024-04-27 6/300 2024-04-28 08:35 by ou0551
[论文投稿] AC审稿 +3 马winner 2024-04-26 7/350 2024-04-27 23:33 by topedit
[硕博家园] 聊天 +13 暮色恋伊人 2024-04-22 14/700 2024-04-27 23:26 by @tanzelin
[考研] 没学上 +7 季向阳 2024-04-26 13/650 2024-04-27 20:38 by 一条咸鱼.
[基金申请] 优青已经开始了么? +3 majunge000 2024-04-27 3/150 2024-04-27 18:51 by spring_1987
[考博] 材料方向24博士申请/一作SCI三篇 +3 白天不碰 2024-04-24 5/250 2024-04-27 17:41 by 安塔瓦拉多
[基金申请] 两类问题算是白选了~ +8 jurkat.1640 2024-04-23 13/650 2024-04-27 12:03 by 淀粉搬运工
[教师之家] 某种做法不行。说过几遍了。同学还那样做。再那样做就给低分 +4 河西夜郎 2024-04-24 4/200 2024-04-26 08:51 by Quakerbird
[考博] 24年 申博 化学/材料 一作6篇sci +9 wangyp123 2024-04-23 11/550 2024-04-24 19:01 by bangbangbiu
信息提示
请填处理意见