芽孢杆菌杆菌电转化实验已经做了2个月了一直导不进去！用的电转仪为BTXECM830，时间常数...6、将5ong质粒DNA(1~8μl)加入到6oμl感受态细胞中，冰上孵育2min,加入预冷的电转杯(1mm)中，电击。...

救命，用的pCasKP质粒，但是一直电转不进去大肠杆菌感受态，不知道哪里出了问题

用的ppic9k质粒，电转涂板后用感受态做阴性对照，第五天长菌了，形态和酵母是一样的，按理来说没有整合进去应该不长菌呀。另外我又直接拿冻存的甘油菌涂md板，也一样长了。我现在能解释的...

我用的ppic9k质粒，电转涂板后用感受态做阴性对照，第五天长菌了，形态和酵母是一样的，按理来说没有整合进去应该不长菌呀。另外我又直接拿冻存的甘油菌涂md板，也一样长了。我现在能解释的...

唯一的不同可能是我们把供体片段连接到pSGAb上了，因为担心供体和质粒一起电转效率不高。在每一步质粒操作前都PCR验证过质粒上的...是不是按照文章里面写的用单链供体片段和质粒一起转进去比较...

在做野生菌的一个功能验证，需要对其某个基因进行敲除，分别用了pre112自杀质粒和pDS132自杀质粒构建了敲除载体，质粒可以电转进去，已经在抗性平板上生长，但是挑斑检测要敲的基因还在，...

本人现在在做枯草芽孢杆菌的基因敲除和导入，质粒为pRH030，该质粒为pOJE08999的改造质粒，铺板的kanR浓度是25mg/ml,20mlagar中...现在试了化转和电转都转不进去，想要求助一下在做枯草的大家

质粒1.5kb，细菌细胞壁稍厚，电转仪转化做了十几遍也转不进去，质粒也检查了没问题

从七月份开始做电转，想转一个荧光质粒进去，看到一篇文献用的也是解淀粉，我的质粒跟文献里的质粒是一样的，方法也是一样的，可是就是转不进去！找不到原因，有没有大神做过这个菌饿，电转...

请问有大佬做过金黄杆菌的基因敲除么，做了两个月一直都是野生型，三亲杂交，连单交换都没有得到，电转，质粒也是一直转不进去，有没有大佬能够分享一下经验的啊，太难了！

求助各位大神，red同源重组后，转化pcp20质粒到大肠去除km抗性，但是一直都转不进去，电转和热激都尝试了，都不行，不知道什么原因，请各位大神施于援手

最近在利用Crispr-Cas9系统做铜绿假单胞菌的基因敲除，但是Cas9质粒（本质粒带有tet抗性）电转进去铜绿里，涂tet板长，转移到含有tet的LB试管里就长不起来了呢，有没有大神可以指教呀？

有做电转Bt感受态细胞的小伙伴嘛，我已经做了半年将去过甲基化的重组质粒电转Bt感受态细胞HD73(cry-)，但是一直转不进去，就是涂板过夜培养后老是不长任何单菌落(抗性肯定没问题)，感受态...

有做电转Bt感受态细胞的小伙伴嘛，我已经做了半年将去过甲基化的重组质粒电转Bt感受态细胞HD73(cry-)，但是一直转不进去，就是涂板过夜培养后老是不长任何单菌落(抗性肯定没问题)，感受态...

我最近转染jurkat瞬转先用脂质体2000后用fugenehd都效果很...仍然转不进去，且细胞几乎全部死亡。质粒在293T里面表达没有任何问题，请问各位战友有何建议？电转程序有哪里可以改进的？先谢谢了

想选购一台电转仪，目前对lonza2b电转仪和日本nepa21型电转仪感兴趣，lonza2b是老型号，无法试用，但是是大品牌，nepa21不出名但是我试用了一下，质粒可以转进去，但是死亡细胞很多，效果...

我分析后觉得同样的转化方法亚细胞定位的载体可以转化成功证明转化方法没有问题，感受态细胞也没有问题，为什么会转不进去呢？重组载体在DH5a中也是用的卡娜抗性，...3.电转和冻融法影响大吗？...

我用的穿梭质粒phcmco4，电转就是转不进去，各种电机条件都尝试了。求大神指导一下，那种方法能有效的转进去，我有看到用化学转化法的，但是说的都不一样。有没有确定能好用的感受态制备...

已经连续快20天了,还没有成功转进去,我用的质粒是...5.60μl感受态细胞+pcm20质粒（40ng/μl，2μl，4μl，10μl也都试过了）DNA混匀转移至预冷的电转杯（1mmgap）中，冰浴时间不超过5min（冰...

构建了一个荧光蛋白的质粒，电转金葡N次不成功，怀疑是菌株的问题，我们实验室之前没转过金葡，有没有大神曾经转进去过，求指导

这里也是众说纷纭的一个地方，有人推荐二次接种的时候把阿拉伯糖就加进去；...转入pCP20质粒，30℃长出单克隆，挑单克隆30℃培养几个小时后，提高温度到42℃过夜，第二天早上分别稀释涂板，...

PKD46质粒会对菌体生长造成伤害或者影响吗？将它倒入野生型大肠杆菌为什么这么难，化转电转都倒不进去。[发自小木虫ios客户端

EcN感受态自制培养到OD600为0.5-0.7，冷冻20min,10％甘油洗3次，1ul质粒加到40ul菌，电压2.5V电转一直转不进去，求大神指导[发自小木虫android客户端]

有人做过nissle1917的转化吗？我的质粒9k左右，化学转和电转一直转不进去，做过的能交流一下吗？发自小木虫android客户端]

实验室有一株菌，革兰氏阴性菌，质粒用化学法转不进去，电转效率也非常之低。有没有商品化感受态制备试剂盒？能用于制备革兰氏阴性菌的（非大肠杆菌！非大肠杆菌！非大肠杆菌！...