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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于野生菌基因敲除，质粒转进去后不发生重组
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新虫 (小有名气)

[求助] 关于野生菌基因敲除，质粒转进去后不发生重组 已有1人参与

在做野生菌的一个功能验证，需要对其某个基因进行敲除，分别用了pre112自杀质粒和pDS132自杀质粒构建了敲除载体，质粒可以电转进去，已经在抗性平板上生长，但是挑斑检测要敲的基因还在，没有发生重组。请问这是咋会呢。。已经做了3个多月了，还是没啥进展，麻烦各位给分析分析，，谢谢
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1楼 2022-05-21 09:17:29
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liu5610372

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你应该是利用重圆重组的方法吧。这个方法的效率很低，半年能做出来都是快的，做个一年都很正常。你敲的是哪个菌？电转，应该是阳性菌，本来就难敲
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2楼2022-05-28 21:00:07
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新虫 (小有名气)
引用回帖:
2脗楼: Originally posted by liu5610372 at 2022-05-28 21:00:07
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3楼2023-06-02 17:28:38
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