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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于野生菌基因敲除，质粒转进去后不发生重组
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新虫 (小有名气)

[求助] 关于野生菌基因敲除，质粒转进去后不发生重组 已有1人参与

在做野生菌的一个功能验证，需要对其某个基因进行敲除，分别用了pre112自杀质粒和pDS132自杀质粒构建了敲除载体，质粒可以电转进去，已经在抗性平板上生长，但是挑斑检测要敲的基因还在，没有发生重组。请问这是咋会呢。。已经做了3个多月了，还是没啥进展，麻烦各位给分析分析，，谢谢
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1楼 2022-05-21 09:17:29
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下一站lover

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2脗楼: Originally posted by liu5610372 at 2022-05-28 21:00:07
脛茫脫娄赂脙脢脟脌没脫脙脰脴脭虏脰脴脳茅碌脛路陆路篓掳脡隆拢脮芒赂枚路陆路篓碌脛脨搂脗脢潞脺碌脥拢卢掳毛脛锚脛脺脳枚鲁枚脌麓露录脢脟驴矛碌脛拢卢脳枚赂枚脪禄脛锚露录潞脺脮媒鲁拢隆拢脛茫脟脙碌脛脢脟脛脛赂枚戮煤拢驴碌莽脳陋拢卢脫娄赂脙脢脟脩么脨脭戮煤拢卢卤戮脌麓戮脥脛脩脟脙

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3楼2023-06-02 17:28:38
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liu5610372

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你应该是利用重圆重组的方法吧。这个方法的效率很低，半年能做出来都是快的，做个一年都很正常。你敲的是哪个菌？电转，应该是阳性菌，本来就难敲
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2楼2022-05-28 21:00:07
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