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分类 共搜索到 210 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 干货分享|关于质粒提取的那些事儿
大肠杆菌是革兰氏阴性菌，细胞壁最外层是脂多糖LPS，携带负...维真生物的过表达载体是低拷贝质粒，对于此类质粒载体，若需要大量质粒或者小提质粒的实验效果不好时，则需要加大提取的菌体量，...
 科研顾问_Gu 2024-05-07 06:38
分子生物 关于质粒提取的那些事儿
大肠杆菌是革兰氏阴性菌，细胞壁最外层是脂多糖LPS，携带负...维真生物的过表达载体是低拷贝质粒，对于此类质粒载体，若需要大量质粒或者小提质粒的实验效果不好时，则需要加大提取的菌体量，...
 科研实验_研实 2024-05-07 01:03
生物科学 干货分享|关于质粒提取的那些事儿
大肠杆菌是革兰氏阴性菌，细胞壁最外层是脂多糖LPS，携带负...维真生物的过表达载体是低拷贝质粒，对于此类质粒载体，若需要大量质粒或者小提质粒的实验效果不好时，则需要加大提取的菌体量，...
 超困困狗g 2024-05-07 01:58
生物科学 干货分享｜关于质粒提取的那些事儿
大肠杆菌是革兰氏阴性菌，细胞壁最外层是脂多糖LPS，携带负...维真生物的过表达载体是低拷贝质粒，对于此类质粒载体，若需要大量质粒或者小提质粒的实验效果不好时，则需要加大提取的菌体量，...
 MDL实验室 2024-05-06 09:55
医学 动物模型|荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
luc+为载体骨架，将荧光素酶表达基因插入其中，转入E.coliDH5α大肠杆菌感受态细胞...Raji-luc+细胞和Raji细胞具有相似的生长趋势，表明Raji-luc+细胞荧光素酶的过表达并未影响细胞生长周期。...
 科研战神·王 2024-03-13 05:09
分子生物 蛋白提取纯化
蛋白提取纯化方法01、蛋白质（包括酶）的提取大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、...用稀酸或稀碱提取时，应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离...
 MDL医学实验 2024-02-19 02:12
分子生物 干货分享|化学感受态细胞进行转化的选择法则
dam和dcm基因分别编码大肠杆菌中最常见的两种甲基化酶，即DNA腺嘌呤甲基化酶和DNA胞嘧啶甲基化酶。...（5）重组蛋白在细菌中的表达重组蛋白表达中最常用的大肠杆菌菌株是BL21及其衍生菌株。
 MDL医学实验 2024-02-18 03:32
分子生物 无缝克隆构建重组载体，测序出错
感觉毕不了业了大家好，想请教一下论坛的各位大佬，小弟最近在做克隆表达，连接方式是同源重组，目的基因是链霉菌胰蛋白酶基因，...我用过诺维赞的超高保真酶和上海生工的高保真酶，两种的酶的...
 秦风拂面 2024-01-29 11:42
生物科学 质粒提取的小技巧
或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切...6.大肠杆菌转化实验有时候第一天涂的转化平板、次日早晨转化子可能长成的菌落比较大(1~2毫米以上，BL21就长得快)，下一步转化子做质粒...
 Sh毕合生物 2024-01-25 12:04
生物科学 做原核表达，请注意你的蛋白
胞质蛋白——大肠杆菌系统分泌蛋白——酵母表达系统（因为大肠杆菌系统缺乏翻译后修饰功能)膜蛋白——杆状病毒或酵母表达系统2....减慢或暂停翻译GC含量过低(小于30%)则会减慢转录延伸，不利于...
 球场下雪了 2024-01-11 01:14
分子生物 干货分享|化学感受态细胞进行转化的选择法则
dam和dcm基因分别编码大肠杆菌中最常见的两种甲基化酶，即DNA腺嘌呤甲基化酶和DNA胞嘧啶甲基化酶。...（5）重组蛋白在细菌中的表达重组蛋白表达中最常用的大肠杆菌菌株是BL21及其衍生菌株。
 球场下雪了 2023-11-07 01:28
生物科学 蛋白提取纯化常见问题？
可能是样品中细胞碎片或其他杂颗粒所致，所以样品一定要高速离心，并过0.22...（2）去大肠杆菌自身带（两条30KD-40KD）可用非变性缓冲液超声悬浮（加入去垢剂），离心6000r/min，30min，10℃。...
 科研小努力 2023-09-25 02:19
分子生物 干货分享|又一城，蛋白提取纯化，收入囊中
蛋白提取纯化方法01、蛋白质（包括酶）的提取大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液，少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、...用稀酸或稀碱提取时，应防止过酸或过碱而引起蛋白质可解离...
 球场下雪了 2023-09-22 03:53
生物科学 质粒提取的小技巧
或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切...6.大肠杆菌转化实验有时候第一天涂的转化平板、次日早晨转化子可能长成的菌落比较大(1~2毫米以上，BL21就长得快)，下一步转化子做质粒...
 Sh毕合生物 2023-09-21 05:49
生物科学 干货分享|手把手教你做“蛋白纯化”
2、宿主菌株的选择：（1）BL21是最常用于原核表达的菌株之一，主要适用于非毒性蛋白的表达，具有大肠杆菌聚合酶，故可适用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达（如：pGEX，...
 李英华001 2023-08-08 06:07
分子生物 手把手教你做“蛋白纯化”
2、宿主菌株的选择：（1）BL21是最常用于原核表达的菌株之一，主要适用于非毒性蛋白的表达，具有大肠杆菌聚合酶，故可适用于tac或trc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达（如：pGEX，...
 球场下雪了 2023-08-08 02:38
微生物 大肠杆菌过表达酶
使用BL21作为表达菌株，pet-28b(+)作为表达载体，过表达一个酶。第一次质粒转化时酶表达了，活性也有，但后面使用这次质粒转化所做甘油菌进行发酵时，酶的表达量越来越少，第四次时已经基本...
 °v°● 2023-07-10 12:24
药学 噬菌体展示技术及其在抗病毒药物发现中的应用
用洗脱液将阳性噬菌体洗脱并感染大肠杆菌进行扩增,扩增纯化后的噬菌体可投入下一轮循环(图1)。...将表达抗VP35ScFv的质粒转染入表达IFN-β和EBOVVP35蛋白的A549细胞以评价生物淘洗获得的ScFv...
 专注多肽 2023-05-15 03:37
硕博家园 GST纯化目的蛋白降解与有杂带
针对目的蛋白上方70kd左右那个杂蛋白，初步怀疑是大肠杆菌dnak基因产物，根据说明书用50mmtris-hcl、2mmatp、10mmmgso4，ph8.0(说明用...胞内上清表达，表达量和gst融合蛋白相当），之前试过纯...
 圆圈爱圈圆 2023-04-28 08:50
分子生物 GST纯化目的蛋白降解与有杂带
针对目的蛋白上方70kd左右那个杂蛋白，初步怀疑是大肠杆菌dnak基因产物，根据说明书用50mmtris-hcl、2mmatp、10mmmgso4，ph8.0(说明用...胞内上清表达，表达量和gst融合蛋白相当），之前试过纯...
 圆圈爱圈圆 2023-04-28 08:37
医学 荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
luc+为载体骨架，将荧光素酶表达基因插入其中，转入E.coliDH5α大肠杆菌感受态细胞...Raji-luc+细胞和Raji细胞具有相似的生长趋势，表明Raji-luc+细胞荧光素酶的过表达并未影响细胞生长周期。...
 科研梦想 2023-01-11 08:52
生物科学 动物模型|荧光素酶表达的淋巴瘤NCG小鼠模型的构建
DH5α大肠杆菌感受态，带氨苄青霉素的Luria-Bertani(LB)平板上筛选转化子，用引物...Raji-luc+细胞和Raji细胞具有相似的生长趋势，表明Raji-luc+细胞荧光素酶的过表达并未影响细胞生长周期。...
 晚风12351 2023-01-11 06:45
招聘信息布告栏 中国科学院科研物理研究所科研助理招聘岗位及要求
目前，我们已经构建成熟的原核生命体系（大肠杆菌）和真核生命体系（酵母）的体外研究体系，并开展原核和真核基因转录动力学相关的研究...在国际主流学术期刊以第一作者（或通讯作者）发表过高...
 goutoujunshi 2022-09-26 06:37
分子生物 酶的诱导表达
请问有人做过BstDNA聚合酶和大肠杆菌DNA聚合酶诱导表达吗，我做了好几轮了，一直不表达，怎么办
 liu哈 2022-04-29 02:14
微生物 【求助】如何提高p450酶生物转化转化率？
本人做p450酶生物转化的，课题组前期已经对这个酶在大肠杆菌中表达进行了各方面优化。...研二下的我，还没有任何进展，感觉自己的能力有限，想到的基本师兄师姐们都已经做过了，目前组里做生物...
 xyw524 2022-04-28 04:52
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