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pET-30a原核蛋白表达疑问已有1人参与
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新手刚做原核蛋白表达，有许多不明白的地方请教。 1.pET-30a上本身带有两个组氨酸标签，我以后纯化蛋白时要用到组氨酸标签。但是不知道是两个组氨酸标签都留着好还是只留一个好，要是只留一个留哪个呢？还是说根据蛋白大小决定？看到很多前辈说到纯化时挂不上柱子，是不是就和这里组氨酸标签的选择有关系呢？ 2.看到一些帖子说到以后还要去除组氨酸标签，为什么呢？ 2.是否需要自己添加终止子？ 3.蛋白的大小控制在多大合适呢？最终是打算让蛋白入核的。 |
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