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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 如何计算限制性内切酶的用量
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十月啊

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何计算限制性内切酶的用量 已有3人参与

刚开始学习分子生物，想请问一下如何算出限制酶的用量呢，比如分子大小为48502 bp的λ DNA，含7个Nde I酶切位点和5个EcoR I酶切位点，一个AcSTM基因，分子大小264 bp，含有1个Nde I 位点和1个EcoR I酶切位点， 至少需要多少单位的Nde I和EcoR I 酶能将200 ng 的AcSTM 温育1hr后完全消化？怎么能确认这个量是最少需要的呢
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1楼 2016-02-24 22:25:23
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wxj2901

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看看酶的说明书，看看已发表文献，在不就试验试验呗。
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3楼2016-02-25 12:21:07
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fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般我都是用neb的计算器 算法不明

发自小木虫IOS客户端
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2楼2016-02-25 04:35:10
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sunlk

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般是根据质粒的量 一般情况来说1ug质粒的话 用酶0.5ul   就够啦 切3-5个小时。如果是多个酶切位点 估计也就切一下看看是不是该载体，不需要很精确
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很给力
4楼2016-02-25 16:02:16
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