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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » 求助多糖水解程度的鉴定方法【新人诚心求助】
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sora1005

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助多糖水解程度的鉴定方法【新人诚心求助】 已有2人参与

我是本科生，目前在进行一个元素形态分析的实验，做样品分析的时候，有一个关键步骤是鉴定样品处理之后，多糖水解程度的鉴定，但是一直没有找到合适的方法
样液中多糖多到木质素和香菇糖等，纤维素也有一定的量，水解方法是一个探究中的新方法，基本上是直接酸水解的变形，采用盐酸作为水解液，样液中主要的杂质是氯化钠

我是小白，理论知识很多还不是很牢固，烦请大神们多多指教~求轻喷
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1楼 2016-02-15 12:31:55
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BioEES

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 天天小海 at 2016-02-25 17:00:29
请问这位大神，多糖水解时如果用浓硫酸或三氟乙酸，可以直接在玻璃试管里水解吗？有危险吗？实验室没有文献中说的安剖瓶...

可以采用100mL或250mL蓝盖试剂瓶,那种可以耐温的。
下面这个方法看看能否适用，其中第三步是为了防止过程中单糖会分解，进行的回收糖标定，如果是葡萄糖，可以忽略，木糖不能忽略。
这儿的浓酸为人更准确，用天平量的，也可以忽略。对结果几乎没有影响。
冷却时不宜直接放冷水中，瓶子可能会裂，其他应该没有问题。
另外，HPLC分析时分析柱别弄错，这里需要那醇酸柱。

Acid hydrolysis
(1)        Preheat the water bath at 30 ± 1 oC
(2)        Weigh 0.3g biomass (dry basis) to test bottles
(3)        Weigh sugars to test bottles as sugar recovery standards (SRS)
(4)        Add 3.00 ± 0.01 mL of 72% H2SO4, wetted.
(5)        Place the test bottles in the water bath set at 30 oC and hydrolyze for 2 hours
(6)        Add 84mL Water to test bottles (weigh, balance) (4% sulfuric acid)
(7)        Place the test bottles to Autoclave set at 121oC and hydrolyze for 1 hours
(8)        Cool down to room temperature
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YR-王
5楼2016-02-26 09:43:50
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sora1005

银虫 (初入文坛)
我说的鉴定包括能够得到样液中完成水解的多糖的量
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2楼2016-02-15 14:50:55
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BioEES

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
sora1005: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2016-02-28 22:11:28
基本上要知道你在水解前的多糖是哪种类型，即水解后的单糖是什么。可能通过比较彻底的两步酸解法，将多糖水解成单糖，然后用HPLC测定单糖浓度，反算原先的多糖含量。
第二步才是测试样品多糖中的水解程度，同样采用HPLC法测定单糖浓度，与原多糖实际含量比较，就是水解率。
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3楼2016-02-23 18:49:14
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天天小海

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by BioEES at 2016-02-23 18:49:14
基本上要知道你在水解前的多糖是哪种类型，即水解后的单糖是什么。可能通过比较彻底的两步酸解法，将多糖水解成单糖，然后用HPLC测定单糖浓度，反算原先的多糖含量。
第二步才是测试样品多糖中的水解程度，同样采用 ...

请问这位大神，多糖水解时如果用浓硫酸或三氟乙酸，可以直接在玻璃试管里水解吗？有危险吗？实验室没有文献中说的安剖瓶
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4楼2016-02-25 17:00:29
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