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sora1005

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助多糖水解程度的鉴定方法【新人诚心求助】已有2人参与

我是本科生,目前在进行一个元素形态分析的实验,做样品分析的时候,有一个关键步骤是鉴定样品处理之后,多糖水解程度的鉴定,但是一直没有找到合适的方法
样液中多糖多到木质素和香菇糖等,纤维素也有一定的量,水解方法是一个探究中的新方法,基本上是直接酸水解的变形,采用盐酸作为水解液,样液中主要的杂质是氯化钠

我是小白,理论知识很多还不是很牢固,烦请大神们多多指教~求轻喷
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天天小海

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by BioEES at 2016-02-23 18:49:14
基本上要知道你在水解前的多糖是哪种类型,即水解后的单糖是什么。可能通过比较彻底的两步酸解法,将多糖水解成单糖,然后用HPLC测定单糖浓度,反算原先的多糖含量。
第二步才是测试样品多糖中的水解程度,同样采用 ...

请问这位大神,多糖水解时如果用浓硫酸或三氟乙酸,可以直接在玻璃试管里水解吗?有危险吗?实验室没有文献中说的安剖瓶
4楼2016-02-25 17:00:29
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sora1005

银虫 (初入文坛)

我说的鉴定包括能够得到样液中完成水解的多糖的量
2楼2016-02-15 14:50:55
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BioEES

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
sora1005: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2016-02-28 22:11:28
基本上要知道你在水解前的多糖是哪种类型,即水解后的单糖是什么。可能通过比较彻底的两步酸解法,将多糖水解成单糖,然后用HPLC测定单糖浓度,反算原先的多糖含量。
第二步才是测试样品多糖中的水解程度,同样采用HPLC法测定单糖浓度,与原多糖实际含量比较,就是水解率。
3楼2016-02-23 18:49:14
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BioEES

捐助贵宾 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 天天小海 at 2016-02-25 17:00:29
请问这位大神,多糖水解时如果用浓硫酸或三氟乙酸,可以直接在玻璃试管里水解吗?有危险吗?实验室没有文献中说的安剖瓶...

可以采用100mL或250mL蓝盖试剂瓶,那种可以耐温的。
下面这个方法看看能否适用,其中第三步是为了防止过程中单糖会分解,进行的回收糖标定,如果是葡萄糖,可以忽略,木糖不能忽略。
这儿的浓酸为人更准确,用天平量的,也可以忽略。对结果几乎没有影响。
冷却时不宜直接放冷水中,瓶子可能会裂,其他应该没有问题。
另外,HPLC分析时分析柱别弄错,这里需要那醇酸柱。

Acid hydrolysis
(1)        Preheat the water bath at 30 ± 1 oC
(2)        Weigh 0.3g biomass (dry basis) to test bottles
(3)        Weigh sugars to test bottles as sugar recovery standards (SRS)
(4)        Add 3.00 ± 0.01 mL of 72% H2SO4, wetted.
(5)        Place the test bottles in the water bath set at 30 oC and hydrolyze for 2 hours
(6)        Add 84mL Water to test bottles (weigh, balance) (4% sulfuric acid)
(7)        Place the test bottles to Autoclave set at 121oC and hydrolyze for 1 hours
(8)        Cool down to room temperature

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5楼2016-02-26 09:43:50
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