| 查看: 299 | 回复: 7 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 sunmaocai 的 5 个金币 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助 关于PCR
|
|||
| pcr和RT-PCR的引物和反应条件是不是一样？ |
回复此楼» 猜你喜欢
请教限项目规定
已经有4人回复
-
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有8人回复
-
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有26人回复
-
最失望的一年
已经有7人回复
-
推荐一本书
已经有16人回复
-
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？
已经有20人回复
-
26申博
已经有3人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有10人回复
-
基金申报
已经有6人回复
-
疑惑？
已经有5人回复
huaxiaojiegg
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 381.5
- 帖子: 35
- 在线: 4.8小时
- 虫号: 480275
- 注册: 2007-12-15
- 性别: GG
- 专业: 中药鉴定
看看吧
|
RT-PCR是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平，细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。使用天为时代公司的总RNA提取系统（如目录号 DP405和DP406），所获得的RNA的纯度高，基因组DNA污染少，用于RT-PCR系统可得到满意结果。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、Oligo dT 及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA，三种都可。 PCR反应体系与反应条件 标准的PCR反应体系： 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10～100pmol 模板DNA 0.1～2ug Taq DNA聚合酶 2.5u Mg2+ 1.5mmol/L 加双或三蒸水至 100ul |
8楼2008-10-09 08:48:42
2楼2008-10-08 17:01:30
3楼2008-10-08 17:14:43
chenliang_0513
铁杆木虫 (职业作家)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 贵宾: 0.01
- 金币: 8830.8
- 散金: 353
- 红花: 3
- 沙发: 3
- 帖子: 3036
- 在线: 347.9小时
- 虫号: 243880
- 注册: 2006-04-15
- 性别: GG
- 专业: 细胞信号转导
4楼2008-10-08 19:21:39