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skimile

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教一些关于荧光染色的问题!

前提就是我们实验室比较穷,要买新的试剂教授估计不太会同意。
然后请求教一下大家我这种情况应该怎么办。第一次想做双重的,大家不要嫌弃我笨。

想做的双重荧光染色,关于抗体A和抗体B。A和B都是anti-rabbit的。
实验室有的Alexa的试剂是 488 Goat Anti-Mouse和Anti-Rabbit; 555 Goat Anti-Mouse。

自己网上查了一下,自己的一次抗体是Anti-Rabbit应该用的二次抗体也是Anti-Rabbit的,那就是说实验室能用的只有Alexa 488 Goat Anti-Rabbit, 是这样吗?
自己比较想用两种颜色表示,这样看起来比较清楚,因为A和B表达的位置挺重叠的。

想问问大家有什么办法嘛,谢谢大家了~
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huajunwux

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-02-12 22:39:02
您分析的是正确的。

间接双染,
一抗应该是不同species,如鼠源A抗,兔源B抗,
相应的二抗也应该是抗鼠,抗兔;
二抗的荧光标记也应该不同。
2楼2016-02-12 21:01:48
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