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有用镍柱做蛋白纯化的吗？
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| 那个镍柱树脂再生的时候，有好几种缓冲液，成分都一样，pH不一样，请问是用什么调节pH的？ |
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nnxqwei
至尊木虫 (职业作家)
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司马诸葛(金币+3,VIP+0):辛苦辛苦 8-11 19:28
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镍柱NTA树脂再生步骤： （1）从层析柱下端流干所有溶液，用2倍NTA树脂体积的0.2M Acetic Acid/6M guanidine HCl 洗。 （2）用2倍体积的去离子水洗。 （3）用3倍体积的2% SDS洗。 （4）用1倍体积的25%乙醇洗。 （5）用1倍体积的50%乙醇洗。 （6）用1倍体积的75%乙醇洗。 （7）用5倍体积的100%乙醇洗。 （8）用1倍体积的75%乙醇洗。 （9）用1倍体积的50%乙醇洗。 （10）用1倍体积的25%乙醇洗。 （11）用1倍体积的去离子水洗。 （12）用5倍体积的0.1M EDTA pH8.0 洗。 （13）用3倍体积的去离子水洗。 （14）如果立即使用，用5倍体积的100mM NiSO4.6H2O洗，再用10倍体积的平衡溶液（NTA-0 Buffer或GuNTA-0 Buffer）洗。 （15）如果想长期储存，加入1倍体积的20%乙醇，4度保存，使用前需要执行步骤14。 |
3楼2008-10-17 00:26:14