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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大肠杆菌涂板不匀问题
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

[交流] 大肠杆菌涂板不匀问题

诸位大侠，小弟最近做大肠杆菌的平板涂布存活实验，为什么总是出现线状的菌斑，还是成片的，具体描述就像风吹柳条一样，都向一个方向飘。应该不是涂板不匀啊，因为连成一团的现象还不算多。紧急求教！
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1楼 2008-10-08 00:08:50
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tigerzh

铁杆木虫 (正式写手)
我也出现过类似情况，就是涂板不均匀照成的！
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wherethereisawill,thereisaway!
2楼2008-10-08 08:01:21
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greenspringmi

银虫 (正式写手)
你的板是加了抗生素的吗？
抗生素失效会导致你所说的现象的
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3楼2008-10-08 09:06:35
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bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓
★ ★ ★ ★
lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q`
xuehu2008(金币+3,VIP+0):谢谢 3-27 11:08
我感觉原因有几个：
  1、涂板用的菌体量过大，这样很难获得单菌落，可以梯度涂板，以获得最佳效果；
  2、涂板时间不够，应该将板上的菌液涂干才好；
  3、如楼上所言，抗生素失效，可以接种没有该抗性的菌体检测一下，最好也是大肠杆菌，10h左右就出结果了。
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4楼2008-10-08 09:14:21
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amberking

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q``
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5楼2008-10-08 09:25:04
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
可以试下用玻璃珠代替涂布棒试下
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2008-10-08 10:23:09
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
谢谢诸位大侠指点，
为什么抗生素失效会导致上述结果呢？
bioartist说涂板时间不够，amberking 又说涂板时间太长，到底是为什么呢？
又及，我同时涂两种菌，一种抗卡纳，一种无抗性，都出现了大量上述情况啊......
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7楼2008-10-08 23:32:35
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smallcat227

木虫 (著名写手)
哈哈，偷懒怎么是时间长呢……?

这样的话可能就是菌体太多的原因，稀释下再涂？

另外，你每次涂布加多少菌液？100ul?
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8楼2008-10-08 23:40:41
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
是100ul啊,我再试下
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9楼2008-10-09 09:04:52
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logan2929

铜虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q~~
同志们，我有绝招，是以前本科实习时老师教的。现将菌液稀释到一定倍数，一般是涂布法的10倍以上，然后用移液枪吸取浓度均匀菌液到平板上，多吸些，轻轻转动平板让菌液在板子上摊平，就像烙煎饼，最后将多余的菌液吸出即可，浓度合适的话菌落长的相当漂亮。
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10楼2008-10-09 09:07:31
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