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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

[交流] 大肠杆菌涂板不匀问题

诸位大侠,小弟最近做大肠杆菌的平板涂布存活实验,为什么总是出现线状的菌斑,还是成片的,具体描述就像风吹柳条一样,都向一个方向飘。应该不是涂板不匀啊,因为连成一团的现象还不算多。紧急求教!
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tigerzh

铁杆木虫 (正式写手)

我也出现过类似情况,就是涂板不均匀照成的!
wherethereisawill,thereisaway!
2楼2008-10-08 08:01:21
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greenspringmi

银虫 (正式写手)

你的板是加了抗生素的吗?
抗生素失效会导致你所说的现象的
3楼2008-10-08 09:06:35
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bioartist

木虫 (正式写手)

无菌草莓

★ ★ ★ ★
lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q`
xuehu2008(金币+3,VIP+0):谢谢 3-27 11:08
我感觉原因有几个:
  1、涂板用的菌体量过大,这样很难获得单菌落,可以梯度涂板,以获得最佳效果;
  2、涂板时间不够,应该将板上的菌液涂干才好;
  3、如楼上所言,抗生素失效,可以接种没有该抗性的菌体检测一下,最好也是大肠杆菌,10h左右就出结果了。
4楼2008-10-08 09:14:21
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amberking


lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q``
????????ù?????????Ч?????????

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5楼2008-10-08 09:25:04
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

可以试下用玻璃珠代替涂布棒试下
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2008-10-08 10:23:09
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

谢谢诸位大侠指点,
为什么抗生素失效会导致上述结果呢?
bioartist说涂板时间不够,amberking 又说涂板时间太长,到底是为什么呢?
又及,我同时涂两种菌,一种抗卡纳,一种无抗性,都出现了大量上述情况啊......
7楼2008-10-08 23:32:35
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smallcat227

木虫 (著名写手)

哈哈,偷懒怎么是时间长呢……?

这样的话可能就是菌体太多的原因,稀释下再涂?

另外,你每次涂布加多少菌液?100ul?
8楼2008-10-08 23:40:41
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

是100ul啊,我再试下
9楼2008-10-09 09:04:52
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logan2929

铜虫 (小有名气)


lwf991229(金币+1,VIP+0):3Q~~
同志们,我有绝招,是以前本科实习时老师教的。现将菌液稀释到一定倍数,一般是涂布法的10倍以上,然后用移液枪吸取浓度均匀菌液到平板上,多吸些,轻轻转动平板让菌液在板子上摊平,就像烙煎饼,最后将多余的菌液吸出即可,浓度合适的话菌落长的相当漂亮。
10楼2008-10-09 09:07:31
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