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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 5%蔗糖溶液应该如何配制
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bobby7513

新虫 (小有名气)

[求助] 5%蔗糖溶液应该如何配制 已有1人参与

我需要筛选阳性克隆，载体里含有sacb筛选基因，需要lb培养基里含有5%蔗糖筛选，不知道是在配制lb时就算好加入蔗糖，还是需要另外配制更高浓度的蔗糖液，在使用时加入呢？我在想如果配制lb时加入，颜色变暗会不会影响效果，后面加好像又不好加
谢谢了

另外有了载体序列，如何分析里面各个元件的序列起始点并绘制图谱呢？
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1楼 2016-02-03 17:19:54
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
以前做过，蔗糖不建议高温高压灭菌，因为会焦化，就像您所说的颜色变暗，这个会影响效果的。
我们的做法是配制高浓度蔗糖溶液，过滤除菌，然后往灭菌后的培养基中添加。

如果事先添加到培养基中，则需要115℃灭菌15min，不能时间太长或温度太高。

我们用的质粒是从国外实验室顺过来的……所以也没有图谱，楼主有的话，可否分享一下~谢谢~
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2楼2016-02-04 11:43:41
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