| 查看: 1143 | 回复: 2 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
redking2012木虫 (正式写手)
|
[交流]
荧光蛋白报告基因在基因组编辑中的作用已有1人参与
|
||
|
最近在想一个问题关于怎么更加高效的使用荧光蛋白报告基因来更快的筛选出编辑正确的细胞。通常我们在细胞内过表达zinc finger或者talen 和crispr cas9，以及靶标导向的元件，通常我们可以给细胞提供一个供体质粒：带有两个同源臂，同源臂上带有想要引入的突变，同源臂之间带有荧光蛋白标签。通过同源臂重组，突变被引入基因组，同时荧光蛋白报告基因也被引入基因组，通过流式细胞筛选带有荧光的单细胞，这种方法可以快速富集编辑成功的细胞。那么我们可不可以同时构建两个供体质粒，分别带有不同荧光，流式细胞筛选带有两种荧光的细胞，这种细胞理论上应该是两个拷贝都被成功的编辑了。 另外我想问问大家，过多的荧光筛选对细胞有什么伤害，这种筛选出来的细胞发表论文的时候，审稿人会不会怀疑该方法的安全性？ 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有190人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
3楼2018-02-05 11:52:41
redking2012
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2446.7
- 散金: 8
- 红花: 1
- 帖子: 449
- 在线: 221.3小时
- 虫号: 1779896
- 注册: 2012-04-26
- 性别: GG
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
2楼2018-02-05 06:13:46