| 查看: 898 | 回复: 1 | ||
[求助]
新手有几个关于WESTER BLOT之前做的BUFFER的问题 已有1人参与
|
|
第一个是关于RIPA BUFFER，我之前在网上看到的配方里面没有DTT，而有的有，做的时候，老师也没要求加，所以我想问下这个DTT是必须的么？查了一下之前有人回答的，答案也是五花八门。这个不加是否会对提取蛋白质造成很大影响呢？ 然后是制备好了protein sample之后，老师也没有让我做离心，而是直接做protein assay (Bradford assay)。。。但是我看不管国内国外材料都写到要做离心，这个不做会有影响么？因为之前有个朋友做蛋白质提取，说也没做离心。 另外对于加蛋白酶抑制剂和磷酸抑制剂，我是直接买的罗氏那个一片片装的 ( Protease Inhibitors - Cocktail Tablets)，对于这个应该放多少在RIPA BUFFER里呢，老师是跟我说各取一片，然后加10ML RIPA buffer 溶解，就行了，我也不太清楚这个浓度怎么算。。希望有大神给指点一下。。 第二个是关于loading buffer, 也是看的网上配方说要加溴酚蓝，但是我老师也没说要加。。。这个有影响么，我知道溴酚蓝是染色的，可以看清电泳进度，那么我不加是否就看不到了呢？ 主要看的实验手册和老师讲的差的有点多，也不知道会不会影响实验结果。。。有点慌张。。。  |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有172人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
yang0071
木虫 (职业作家)
- 应助: 207 (大学生)
- 金币: 1573.4
- 散金: 9319
- 红花: 21
- 帖子: 4041
- 在线: 647.7小时
- 虫号: 50941
- 注册: 2004-07-15
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2016-01-29 11:43:28
20