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依琪看海

新虫 (小有名气)

[求助] pcr 已有1人参与

菌液pcr,出现有目的条带,但找到菌液发现没长菌,这是什么情况?急!!!

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apple870502

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
首先你要排除引物的原因,保证引物的特异性;其次,把菌多摇一段时间,我有的时候摇四五个小时没看见混浊,但是菌液PCR可以P出来,其实是长了的;另外,本实验室的师兄告诉我,挑的菌溶到培养中不培养甚至都能P出来,所以你还要看看你的抗性有没加错或者浓度是不是加错了,换一瓶再试试。实在不行就重新构建吧,不一定每次实验都能很清楚地找到原因,有时候重新做一次比找原因花的时间更短~祝好运!
11楼2016-01-29 15:45:34
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原海亮

木虫 (著名写手)

天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-01-27 19:09:50
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依琪看海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-27 19:09:50
那就是溶菌了吧

什么是溶菌了?才培养了7/8个小时就会溶菌

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3楼2016-01-27 19:52:08
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原海亮

木虫 (著名写手)

就是噬菌体污染,然后菌体发生溶菌了吧,你是挑了单菌落培养,然后几小时后取菌液做pcr,有条带,而菌液继续培养不生长了!?

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
4楼2016-01-27 20:00:40
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依琪看海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-27 20:00:40
就是噬菌体污染,然后菌体发生溶菌了吧,你是挑了单菌落培养,然后几小时后取菌液做pcr,有条带,而菌液继续培养不生长了!?

挑了单菌落,摇了没长,感觉没挑上。但还跑出带了,搞不懂,求解………

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5楼2016-01-27 21:26:33
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原海亮

木虫 (著名写手)

你是做的菌落PCR还是菌液pcr

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天空才是极限,我有信心飞的更高!
6楼2016-01-27 22:08:07
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chenfa1234

铁虫 (小有名气)

没长菌是指菌液没混浊?是不是你挑的菌是死的哦

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7楼2016-01-27 22:10:02
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依琪看海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by chenfa1234 at 2016-01-27 22:10:02
没长菌是指菌液没混浊?是不是你挑的菌是死的哦

菌液没混浊,还跑出带了,怎么情况???

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8楼2016-01-27 23:04:08
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依琪看海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-27 22:08:07
你是做的菌落PCR还是菌液pcr

菌液pcr,菌液没浑浊

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9楼2016-01-27 23:05:03
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chenfa1234

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 依琪看海 at 2016-01-27 23:04:08
菌液没混浊,还跑出带了,怎么情况???
...

只要存在核酸就能跑出带,并不能说明菌是活的

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10楼2016-01-28 00:10:49
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