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鱼丸木有鱼

铁虫 (正式写手)

[求助] 实时荧光定量PCR 已有2人参与

我想在两个物种中比较一个基因，内参怎么设置？？求助~！~~~感激不尽~！~！
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1楼 2016-01-25 13:33:03
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jam2015

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
两个物种同时测一个基因？
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2楼2016-01-25 19:54:27
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xiangbchen

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这种情况建议做绝对定量，相对定量意义不大。

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3楼2016-01-26 01:30:08
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鱼丸木有鱼

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jam2015 at 2016-01-25 19:54:27
两个物种同时测一个基因？

恩，是呀！
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4楼2016-01-29 17:50:50
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鱼丸木有鱼

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiangbchen at 2016-01-26 01:30:08
你这种情况建议做绝对定量，相对定量意义不大。

你好，当初做相对定量就是想比较昆虫和菌上面对这个基因的表达分析，这样做不知道可行不？谢谢你！
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5楼2016-01-29 18:08:42
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wx3280065

银虫 (小有名气)
多找几个内参用genorm normfinder bestkeeper等软件筛选一遍

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6楼2016-01-30 11:26:22
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wx3280065

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wx3280065 at 2016-01-30 11:26:22
多找几个内参用genorm normfinder bestkeeper等软件筛选一遍

找到这两个物种中内参基因中保守区段设计引物，然后用这3个软件评测下，不过基本用genorm就够了，软件会将表达相对稳定的内参筛选出来，然后生成一个标准化因子(normalization factor)然后用这个因子去标准化目的基因。另外genorm还会告诉你用几个内参可以准确标准化目的基因

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7楼2016-01-30 11:32:19
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zjrzj520

新虫 (小有名气)
应该做绝对定量
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坚持
8楼2016-01-31 22:15:55
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