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真果粒

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR问题 已有1人参与

对大约11kb的质粒P全长,跑胶有目的条带,但很暗,但胶孔很暗。这是什么原因?求大神指导。

PCR问题
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徘徊在街头,不知何去何从。
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tams137

铁虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看上去拖尾,应该是目的基因讲解导致,建议跑胶用的水和药品换更高清洁度的
2楼2016-01-27 09:19:44
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chinayanfei

木虫 (小有名气)

可能是退火温度偏低…适当高一点点或许会好点…我没看错你胶孔在上方应该很亮啊?不是暗~可以是二聚体

发自小木虫Android客户端
3楼2016-02-19 12:10:08
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小路little

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2016-02-19 17:38:45
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真果粒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-02-19 12:10:08
可能是退火温度偏低…适当高一点点或许会好点…我没看错你胶孔在上方应该很亮啊?不是暗~可以是二聚体

写错了,是孔里比较亮。谢谢了

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徘徊在街头,不知何去何从。
5楼2016-02-22 12:38:12
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真果粒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chinayanfei at 2016-02-19 12:10:08
可能是退火温度偏低…适当高一点点或许会好点…我没看错你胶孔在上方应该很亮啊?不是暗~可以是二聚体

用了两步法,即退火和延伸温度都是68摄氏度。

发自小木虫Android客户端
徘徊在街头,不知何去何从。
6楼2016-02-22 12:39:18
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fudan671

木虫 (著名写手)

拖带,建议提高pcr温度,然后多加样品,做胶回收
7楼2016-02-24 09:46:44
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