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PCR问题
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真果粒
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PCR问题
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对大约11kb的质粒P全长,跑胶有目的条带,但很暗,但胶孔很暗。这是什么原因?求大神指导。
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徘徊在街头,不知何去何从。
1楼
2016-01-24 10:34:30
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tams137
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
看上去拖尾,应该是目的基因讲解导致,建议跑胶用的水和药品换更高清洁度的
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2楼
2016-01-27 09:19:44
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chinayanfei
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可能是退火温度偏低…适当高一点点或许会好点…我没看错你胶孔在上方应该很亮啊?不是暗~可以是二聚体
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3楼
2016-02-19 12:10:08
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小路little
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4楼
2016-02-19 17:38:45
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真果粒
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Originally posted by
chinayanfei
at 2016-02-19 12:10:08
可能是退火温度偏低…适当高一点点或许会好点…我没看错你胶孔在上方应该很亮啊?不是暗~可以是二聚体
写错了,是孔里比较亮。谢谢了
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徘徊在街头,不知何去何从。
5楼
2016-02-22 12:38:12
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真果粒
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Originally posted by
chinayanfei
at 2016-02-19 12:10:08
可能是退火温度偏低…适当高一点点或许会好点…我没看错你胶孔在上方应该很亮啊?不是暗~可以是二聚体
用了两步法,即退火和延伸温度都是68摄氏度。
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6楼
2016-02-22 12:39:18
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fudan671
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拖带,建议提高pcr温度,然后多加样品,做胶回收
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7楼
2016-02-24 09:46:44
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