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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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麦子果树

新虫 (小有名气)

[求助] km值 已有1人参与

求算km时,对酶液有什么具体要求。例如纯度之类的
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麦子果树

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by noblefire at 2016-01-23 20:32:34
计算Km值不需要酶的纯度很高,只要pH,温度,缓冲液,其他底物的浓度一定的情况下Km值是一个固定的值。但是kcat(Vmax)的计算需要知道酶的纯度。

如果酶促反应过程中,酶液中含有其他影响该反应的物质,那不就不能客观反映该酶的兴致了,该怎样排除呢?
3楼2016-01-24 16:35:54
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noblefire

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
计算Km值不需要酶的纯度很高,只要pH,温度,缓冲液,其他底物的浓度一定的情况下Km值是一个固定的值。但是kcat(Vmax)的计算需要知道酶的纯度。
2楼2016-01-23 20:32:34
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noblefire

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 麦子果树 at 2016-01-24 16:35:54
如果酶促反应过程中,酶液中含有其他影响该反应的物质,那不就不能客观反映该酶的兴致了,该怎样排除呢?...

不能排除,因为你无法确定细胞中你的酶的抑制剂是什么,也不知道抑制类型。所以进行纯化有必要,哪怕只是初步纯化。甚至只是通过透析去除小分子。

发自小木虫Android客户端
4楼2016-01-24 16:40:10
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麦子果树

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by noblefire at 2016-01-24 16:40:10
不能排除,因为你无法确定细胞中你的酶的抑制剂是什么,也不知道抑制类型。所以进行纯化有必要,哪怕只是初步纯化。甚至只是通过透析去除小分子。
...

经过一定的纯化后,再计算km值时,已经默认整个反应体系是没有其他物质干扰该反应的?
5楼2016-01-24 16:43:44
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