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佛怒轮回

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
帖子: 1
在线: 50分钟
虫号: 3874129
注册: 2015-05-17
专业: 循环系统疾病其他科学问题

[求助] western blot 120kd hrp-ecl 发光，无结果（一片黑，无条带）

WB 大体步骤条件
1.    1.5cm玻璃板
2.    8%分离胶
3. 电泳：浓缩胶，恒压80v.约30min; 分离胶，恒压100v,约1h.
4.    湿转：恒流300mA,  约2h。
5. 转膜结束后，TBST洗膜5次，每次3min。  BSA封闭1.5h.  TBST洗膜5次，每次3min. 一抗孵育，4℃过夜。
6. TBST洗膜5次，每次3min. 二抗结合，室温轻摇1h.
7. HRP-ECL(1:1)发光。

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1楼 2016-01-22 21:24:22

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