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western blot 120kd hrp-ecl 发光,无结果(一片黑,无条带)
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WB 大体步骤条件 1. 1.5cm玻璃板 2. 8%分离胶 3. 电泳:浓缩胶,恒压80v.约30min; 分离胶,恒压100v,约1h. 4. 湿转:恒流300mA, 约2h。 5. 转膜结束后,TBST洗膜5次,每次3min。 BSA封闭1.5h. TBST洗膜5次,每次3min. 一抗孵育,4℃过夜。 6. TBST洗膜5次,每次3min. 二抗结合,室温轻摇1h. 7. HRP-ECL(1:1)发光。 |
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