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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母发酵液分离怎么算酶活收率比较合适
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ldy1985

木虫 (正式写手)

[交流] 毕赤酵母发酵液分离怎么算酶活收率比较合适

毕赤酵母高密度发酵酶蛋白，在计算放罐总酶活时，怎么计算合适
1，发酵液离心，取定量上清液稀释到一定范围后测酶活，用酶活单位乘以发酵液体积作为总酶活单位
2，取定量发酵液，直接稀释，离心得上清液测酶活，用酶活单位乘以发酵液体积做总酶活单位。
方法1，结果偏高，把菌体体积计入；方法2，可能会结果偏低
如果按方法1，我怎么判断在后续分离过程中把酶完全分离出来
谢谢
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高密度发酵

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1楼 2016-01-22 20:51:52
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Victophe

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
测定发酵液湿重，酶活*发酵液体积*(1-湿重)

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2楼2016-01-22 21:06:24
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ldy1985

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Victophe at 2016-01-22 21:06:24
测定发酵液湿重，酶活*发酵液体积*(1-湿重)

这么算结果应该低了，实验室收率会超过100%，生产上可能不会。比如在实验室，我们为了有高回收率，会把重相再次加水搅拌后离心，尽量把酶都洗出来。
不过也有蛮多公司是这么算的
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3楼2016-01-22 21:23:41
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Victophe

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
好吧，生产没有做这么细！

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4楼2016-01-22 21:33:16
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Victophe

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
ldy1985: 金币+3, 谢谢 2016-01-23 19:37:31
你可以把第一次分离到的上清和重相中洗出来的加在一起就是用酶活了

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5楼2016-01-22 21:34:43
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boysil

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
比如取10毫升发酵液离心，得到8毫升上清，将上清再稀释至10毫升，然后测酶活，得到酶活后直接乘以发酵体积，即为放罐总酶活
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6楼2016-01-25 09:37:31
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