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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跑荧光
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吕木木

新虫 (小有名气)

[交流] 跑荧光

比如草莓的基因转进拟南芥里，我做荧光定量时，引物还是设计成草莓基因的荧光引物吗？设计了好几条引物，先跑PCR检测一下都不能检测出条带，只有引物二聚体！浪费了好多钱了

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1楼 2016-01-21 22:13:22
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pjxiongjing

新虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
9楼: Originally posted by hanxiaominhu at 2016-01-24 09:18:45
建议你先检测一下转基因株系的gDNA和cDNA里是否有你的目的基因。

普通PCR检测都是阳性，野生型也扩不出来，一上定量，野生型里全有目的基因

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11楼2017-07-21 22:11:42
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skyish
★
吕木木(金币+1): 谢谢参与
一

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2楼2016-01-21 22:19:28
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
外源基因整合到基因组上序列是不会改变的，转录出来的mRNA应该也不会有碱基改变，所以按照草莓基因设计引物是可以的。
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5楼2016-01-22 08:52:05
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反应链

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
What was the length of your amplicon? How did you screen the positive transgene lines?
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6楼2016-01-22 11:41:52
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