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科大小飞

铁虫 (初入文坛)

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性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 怎么把杆状病毒Bacmid（186413bp）电转化到BW25113/pkd46 RED重组系统中？？急急急！

最近一直在做基因敲除，用的是RED重组系统将杆状病毒基因组上的某个基因敲掉。所以首先得将杆状病毒的基因组先电转入到BW25113/PKD46系统中，然后再进行敲除。现在的问题是杆状病毒的基因组（186413bp）一直转化不到BW25113里。救急啊

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天道酬勤

1楼 2016-01-19 21:11:29

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xuzhangxm

新虫 (初入文坛)

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我也在做，同求

在路上

2楼2016-03-11 09:55:28

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i760912798

木虫 (正式写手)

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我也在用这个系统敲除基因，但是，设计长引物扩增重组片段同源臂，不管是普通taq酶还是高保真酶扩增，同源臂还是突变，有什方法可以避免？

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3楼2016-03-24 23:27:25

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i760912798

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引用回帖:

2楼: Originally posted by xuzhangxm at 2016-03-11 09:55:28
我也在做，同求

我也在敲除基因，扩增出同源臂有突变，已经重复几次还是有突变，用什么方法避免同源臂序列突变？

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4楼2016-03-24 23:42:59

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