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[求助]
紧急求助！！！蛋白凝胶的SDS-PAGE。 已有2人参与
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朋友们，我做蛋白凝胶的SDS-PAGE，可是做了两次都跑不出来。。。 第一次是把0.3g样品容到15mL尿缓冲液（内含20mM Tris, 8M 尿素，2%SDS和2%β-巯基乙醇，pH=8）,匀浆（10000r/min，5min）,然后煮沸2min，室温下摇荡12h，然后用10%的分离胶和3%的浓缩胶。可能是浓度太低，没有跑出来。 第二次把1g样品容到10ml尿缓冲液 里，可是还是没跑出来，堵住了上样口。 我分析了失败的三种可能原因： 一是前处理方法不对； 二是尿缓冲液配制方法不对，我是将所有东西都称量好后再定容。pH有8.7多。。。 三是浓度不对。 请高手指点。金币虽少，但已倾囊。 |
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5楼2016-09-21 15:21:59
2楼2016-01-23 14:35:28
fudan671
木虫 (著名写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 2149.1
- 散金: 335
- 红花: 7
- 帖子: 1343
- 在线: 45小时
- 虫号: 4075866
- 注册: 2015-09-16
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
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hekan0825(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2016-02-23 21:54:17
hekan0825(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助，希望继续关注楼主回复，谢谢 2016-02-23 21:54:17
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你初始的配胶怎么样？然后电压80跑2个小时。正常加样。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-02-13 09:31:31
4楼2016-09-18 10:47:30
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