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紧急求助!!!蛋白凝胶的SDS-PAGE。 已有2人参与
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朋友们,我做蛋白凝胶的SDS-PAGE,可是做了两次都跑不出来。。。 第一次是把0.3g样品容到15mL尿缓冲液(内含20mM Tris, 8M 尿素,2%SDS和2%β-巯基乙醇,pH=8),匀浆(10000r/min,5min),然后煮沸2min,室温下摇荡12h,然后用10%的分离胶和3%的浓缩胶。可能是浓度太低,没有跑出来。 第二次把1g样品容到10ml尿缓冲液 里,可是还是没跑出来,堵住了上样口。 我分析了失败的三种可能原因: 一是前处理方法不对; 二是尿缓冲液配制方法不对,我是将所有东西都称量好后再定容。pH有8.7多。。。 三是浓度不对。 请高手指点。金币虽少,但已倾囊。 |
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fudan671
木虫 (著名写手)
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hekan0825(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-02-23 21:54:17
hekan0825(sytucom代发): 金币+1, 感谢应助,希望继续关注楼主回复,谢谢 2016-02-23 21:54:17
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你初始的配胶怎么样?然后电压80跑2个小时。正常加样。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-02-13 09:31:31
2楼2016-01-23 14:35:28
4楼2016-09-18 10:47:30
5楼2016-09-21 15:21:59










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