24小时热门版块排行榜    

查看: 988  |  回复: 5

Mr.四娃

金虫 (小有名气)

[求助] 连续养菌不成功 已有3人参与

如题,几个月以来一直养菌BL21不成功,转化什么的都很正常,长得看着也正常,但是一转到液体培养基就不行了,之前我是先在5ML小管里养,养的比较浑浊了就放到1L培养基里表达蛋白,但是最近一放到1L培养基里就养不出来了,而且每次液体上面都是白沫,不知道是什么原因,之前三四个小时OD就可以到1,现在7个小时还不行,感觉就养不活,请大家帮助想想办法吧,真心感谢了,有没有哪位遇到相同状况的,再次感谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr.四娃

金虫 (小有名气)

大家都来看看吧,谢谢
2楼2016-01-17 20:34:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-17 22:28:35
Mr.四娃: 金币+20 2016-03-03 20:02:40
噬菌体污染了,建议验证正确的克隆,转接培养进行蛋白诱导时,不要加抗性。另外一些原因,可以考虑重新转化挑选克隆,甚至重新制作感受态细胞。发生溶菌现象的菌液一定不要随便倾倒,可以灭菌处理,避免噬菌体污染扩大。

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
3楼2016-01-17 21:17:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr.四娃

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-17 21:17:33
噬菌体污染了,建议验证正确的克隆,转接培养进行蛋白诱导时,不要加抗性。另外一些原因,可以考虑重新转化挑选克隆,甚至重新制作感受态细胞。发生溶菌现象的菌液一定不要随便倾倒,可以灭菌处理,避免噬菌体污染扩 ...

怎养才能确定是噬菌体污染呢,我们实验室用的是全式金的感受态细胞,如果是噬菌体污染,换一批感受态就能好了吗
4楼2016-01-18 11:13:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
若噬菌体污染严重,仅更换感受态是没用的,噬菌体可能来自于外部实验环境。
建议整个操作空间使用新洁尔灭进行消毒处理。
5楼2016-01-18 13:01:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wtr_00

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉是染菌的症状
6楼2016-01-19 15:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Mr.四娃 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +4 曼111 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:44 by 星空星月
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 一志愿070300浙大化学358分,求调剂! +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123!
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见