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Mr.四娃

金虫 (小有名气)

[求助] 连续养菌不成功 已有3人参与

如题,几个月以来一直养菌BL21不成功,转化什么的都很正常,长得看着也正常,但是一转到液体培养基就不行了,之前我是先在5ML小管里养,养的比较浑浊了就放到1L培养基里表达蛋白,但是最近一放到1L培养基里就养不出来了,而且每次液体上面都是白沫,不知道是什么原因,之前三四个小时OD就可以到1,现在7个小时还不行,感觉就养不活,请大家帮助想想办法吧,真心感谢了,有没有哪位遇到相同状况的,再次感谢
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Mr.四娃

金虫 (小有名气)

大家都来看看吧,谢谢
2楼2016-01-17 20:34:48
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原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-17 22:28:35
Mr.四娃: 金币+20 2016-03-03 20:02:40
噬菌体污染了,建议验证正确的克隆,转接培养进行蛋白诱导时,不要加抗性。另外一些原因,可以考虑重新转化挑选克隆,甚至重新制作感受态细胞。发生溶菌现象的菌液一定不要随便倾倒,可以灭菌处理,避免噬菌体污染扩大。

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
3楼2016-01-17 21:17:33
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Mr.四娃

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-17 21:17:33
噬菌体污染了,建议验证正确的克隆,转接培养进行蛋白诱导时,不要加抗性。另外一些原因,可以考虑重新转化挑选克隆,甚至重新制作感受态细胞。发生溶菌现象的菌液一定不要随便倾倒,可以灭菌处理,避免噬菌体污染扩 ...

怎养才能确定是噬菌体污染呢,我们实验室用的是全式金的感受态细胞,如果是噬菌体污染,换一批感受态就能好了吗
4楼2016-01-18 11:13:06
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lifechuteng

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
若噬菌体污染严重,仅更换感受态是没用的,噬菌体可能来自于外部实验环境。
建议整个操作空间使用新洁尔灭进行消毒处理。
5楼2016-01-18 13:01:18
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wtr_00

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉是染菌的症状
6楼2016-01-19 15:24:12
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