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牧野小桃

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[求助] 利用CRISPR/Cas9技术敲除拟南芥某一功能未知的基因，流程是怎样的？急求！！！！已有2人参与

利用CRISPR/Cas9技术敲除拟南芥某一功能未知的基因，流程是怎样的？急求！！！！
就是这个问题，
还有一个可以将目的基因整合进去？基本过程又是什么？
希望大神帮忙啊，
不要给推荐文献了，直接说一下过程吧，谢啦，明天下午就考试了呢。。

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1楼 2016-01-17 16:04:26

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牧野小桃

新虫 (小有名气)

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着急啊、、

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2楼2016-01-17 16:49:05

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fjtony163

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2016-02-27 16:38:56

具体到这个生物我是不知道了我说一下我们在人体细胞里用的吧设计gRNA 和Cas9 一起通过逆转录进入细胞里 gRNA会和Cas9一起在目的基因附近将双链切断通过细胞的NHEJ （非同源末端链接）会导入碱基对增加或者减少造成随机变异就达到敲除的作用了。

所以主要流程就是设计gRNA 然后和Cas9 一起转染到细胞里基本上没有什么特别复杂的步骤只是说gRNA设计软件也有其局限性一般选取前几位的然后通过实际敲除效果来看到底选哪个比较好。