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牧野小桃新虫 (小有名气)
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利用CRISPR/Cas9技术敲除拟南芥某一功能未知的基因，流程是怎样的？急求！！！！ 已有2人参与
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利用CRISPR/Cas9技术敲除拟南芥某一功能未知的基因，流程是怎样的？急求！！！！ 就是这个问题， 还有一个可以将目的基因整合进去？基本过程又是什么？ 希望大神帮忙啊， 不要给推荐文献了，直接说一下过程吧，谢啦，明天下午就考试了呢。。 |
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牧野小桃
新虫 (小有名气)
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2楼2016-01-17 16:49:05
fjtony163
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2016-02-27 16:38:56
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西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2016-02-27 16:38:56
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具体到这个生物我是不知道了 我说一下我们在人体细胞里用的吧 设计gRNA 和Cas9 一起通过逆转录进入细胞里 gRNA会和Cas9一起 在目的基因附近将双链切断 通过细胞的NHEJ （非同源末端链接）会导入碱基对增加或者减少 造成随机变异 就达到敲除的作用了。 所以主要流程就是设计gRNA 然后和Cas9 一起转染到细胞里 基本上没有什么特别复杂的步骤 只是说gRNA设计软件也有其局限性 一般选取前几位的 然后通过实际敲除效果来看到底选哪个比较好。 |
3楼2016-01-18 05:10:44
4楼2016-01-19 12:14:45
5楼2016-02-27 15:58:49
fudan671
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6楼2016-02-27 18:52:13
20