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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 利用CRISPR/Cas9技术敲除拟南芥某一功能未知的基因，流程是怎样的？急求！！！！
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牧野小桃

新虫 (小有名气)

[求助] 利用CRISPR/Cas9技术敲除拟南芥某一功能未知的基因，流程是怎样的？急求！！！！ 已有2人参与

利用CRISPR/Cas9技术敲除拟南芥某一功能未知的基因，流程是怎样的？急求！！！！
就是这个问题，
还有一个可以将目的基因整合进去？基本过程又是什么？
希望大神帮忙啊，
不要给推荐文献了，直接说一下过程吧，谢啦，明天下午就考试了呢。。
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1楼 2016-01-17 16:04:26
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牧野小桃

新虫 (小有名气)
着急啊、、
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2楼2016-01-17 16:49:05
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fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+4, 鼓励回帖交流 2016-02-27 16:38:56
具体到这个生物我是不知道了 我说一下我们在人体细胞里用的吧 设计gRNA 和Cas9 一起通过逆转录进入细胞里 gRNA会和Cas9一起 在目的基因附近将双链切断 通过细胞的NHEJ （非同源末端链接）会导入碱基对增加或者减少 造成随机变异 就达到敲除的作用了。

所以主要流程就是设计gRNA 然后和Cas9 一起转染到细胞里 基本上没有什么特别复杂的步骤 只是说gRNA设计软件也有其局限性 一般选取前几位的 然后通过实际敲除效果来看到底选哪个比较好。
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3楼2016-01-18 05:10:44
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baobingxiang

新虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 无应助 2016-02-27 16:39:17
同求操作，和设计过程，怎么设计引物啊
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4楼2016-01-19 12:14:45
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日子有风

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by baobingxiang at 2016-01-19 12:14:45
同求操作，和设计过程，怎么设计引物啊

用CRISPR-P设计sgRNA
赞一下 回复此楼
坚持到底，超越自我！
5楼2016-02-27 15:58:49
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fudan671

木虫 (著名写手)
网上有具体信息

发自小木虫IOS客户端
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6楼2016-02-27 18:52:13
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