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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 请教关于两条互补单链DNA分子杂交及杂交温度的问题
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ytianchina8391

金虫 (正式写手)

[求助] 请教关于两条互补单链DNA分子杂交及杂交温度的问题 已有1人参与

本人想使两条互补DNA单链DNA分子杂交合成双链DNA分子，但是不知道杂交温度如何确定。在网上看到了一些信息，有的说在比Tm温度低15度下可以使其杂交，也有的说把两条单链分子混合后，加热到90多度，然后冷却至室温就能够使其杂交成为双链DNA分子，还有的直接就是在室温下混合一段时间就可以了。不知道哪种说法可行，想请专业人士帮我分析一下。
另外，我还有一个疑问，90多度这样的高温，通常不是用来是双链DNA分子分解成为单链的温度吗，为什么可以用来合成双链呢？DNA双链分子分解成单链的温度怎么确定呢？

问题比较多，因为本人不是生物相关专业的，可能问题描述的也不一定专业，所以请大牛们给点意见。多谢了！
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1楼 2016-01-15 08:42:22
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小鱼儿爱你啦

新虫 (小有名气)
我也有这个疑问

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2楼2016-03-24 10:23:33
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15031262071

新虫 (初入文坛)
我也有这个问题，请问你到现在解决了吗
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3楼2016-03-29 20:41:48
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chenj-315

银虫 (正式写手)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-08-12 22:32:02
90度是为了让两条链变性成单链，消除二聚体，然后自然冷却至室温即可

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4楼2016-08-12 21:41:20
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我的大大卷

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果没有二级结构是很容易杂交的，室温或者37度就可以杂交上，如果有二级结构，不容易杂交，那么需要95度退火5min，消除二级结构，再冷却到室温
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5楼2016-12-26 15:39:09
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凌儿凌夷

铜虫 (小有名气)
想问问大家，退火杂交结束后如何鉴定双链DNA是否形成呢？
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6楼2019-12-30 22:10:42
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