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zhuangkai1

银虫 (正式写手)

[求助] pcr引物 已有1人参与

普通pcr和定量pcr的引物的序列可以完全一样吗？

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1楼 2016-01-14 18:56:17
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zhuangkai1

银虫 (正式写手)
本人外行 求大神帮助

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2楼2016-01-14 18:56:53
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dnvcqw

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-14 23:00:00
可以是一样，不过定量的最好多注意下，不然后面的曲线可就不好看了

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

zhuangkai1 zhuangkai1
3楼2016-01-14 19:49:33
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zhuangkai1

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by dnvcqw at 2016-01-14 19:49:33
可以是一样，不过定量的最好多注意下，不然后面的曲线可就不好看了

我之前在文献上看到有人做这种菌的qpcr 现在想做克隆文库 所以想试试 谢谢了啊

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4楼2016-01-14 20:19:43
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zhuangkai1

银虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by dnvcqw at 2016-01-14 19:49:33
可以是一样，不过定量的最好多注意下，不然后面的曲线可就不好看了

你知道做一次定量pcr要是送出去做的话大概多少钱啊？

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5楼2016-01-14 20:20:37
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dnvcqw

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-14 23:00:29
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhuangkai1 at 2016-01-14 20:19:43
我之前在文献上看到有人做这种菌的qpcr 现在想做克隆文库 所以想试试 谢谢了啊
...

一般做rt，基因都会比较短，太长会影响扩增效率而达不到定量的效果，所以定量引物尽量保证特异性且参考融解曲线，做细菌类尽量去除基因组dna干扰，这个有相应试剂盒，里面有酶的，放到外面公司做得看你有多少样品多少基因了，得和他们谈，没有定数

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6楼2016-01-14 21:40:43
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