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依琪看海

新虫 (小有名气)

[求助] 无缝克隆连接2个片段,如何设计引物?载体使用puc21.详细... 已有1人参与

无缝克隆连接2个片段,如何设计引物?载体使用puc21.详细说明一下。 @biostar2009

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依琪看海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hmtpe at 2016-01-14 02:31:03
搜一下Gibson assembly,也有相应的试剂盒卖。

谢谢 @biostar2009

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3楼2016-01-14 08:16:14
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依琪看海

新虫 (小有名气)

5楼2016-01-14 11:21:18
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依琪看海

新虫 (小有名气)

你给分析下:第一片段正向引物:上游载体的同源序列+第一片段正向序列。
第一片段反向引物:第一片段反向序列+第二片段反向序列
第二片段正向引物:第二片段的正向序列+第一片段的正向
第二片段的反向引物:第二片段的反向序列+载体下游反向序列。
是不是这样啊?忘讲解 @biostar2009

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7楼2016-01-14 13:06:45
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