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15292278987

金虫 (初入文坛)

[求助] 转基因拟南芥激素处理萌发实验。 已有2人参与

需要进行拟南芥激素相关的萌发实验,对激素的使用浓度不是很了解。
还请做过的大神指点迷津。计划使用ABA,SA,JA进行实验,希望做过类似实验的提供一下实验使用的激素浓度。
还有NaCl和PEG,最好能一并告知。谢谢!!!
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stay hungry, stay foolish.
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hchen82

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
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5楼2016-01-14 07:54:50
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wx1308897716

木虫 (小有名气)

神虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-13 22:51:43
15292278987: 金币+25, 有帮助 2016-01-16 21:41:56
这个你得自己试一下,做一个梯度实验,ABA,JA我们用过10-100μM,NaCl一般是75-125之间,其他的还没用过
2楼2016-01-13 19:04:01
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15292278987

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wx1308897716 at 2016-01-13 19:04:01
这个你得自己试一下,做一个梯度实验,ABA,JA我们用过10-100μM,NaCl一般是75-125之间,其他的还没用过

在MS培养基中加入10-100μM浓度的激素会不会太高?拟南芥能正常萌发吗?我看文献都是1μM左右的。请教一下!
stay hungry, stay foolish.
3楼2016-01-13 19:10:58
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反应链

新虫 (正式写手)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-01-13 22:52:12
For germination assays scoring ABA sensitivity, 20 to 100 seeds per treatment were surface sterillized in 5% hypochlorite and 0.02% Trition X-100. Seed were then rinsed three or four times with sterile water before plating on minmal medium (Haughn and Somerville, 1986), containing 0.7% agar and ABA (mixed isomers; Sigma) at 3 or 5 uM in 15 X 100mm Petri dishes.

For scoring kanamycin resistance, the medium included 0.5 X Murashige and Skoog salts (Murashige and Skoog, 1962), 1% sucrose, 0.05% Mes, and 50 ug/mL kanamycin.

The dishes were incubated for 1 to 3 days at 4 degrees Celsiu to break any residual dormancy, and then they were tansferred to 22 degrees in continuous light.

References: Finkelstein R R, Lynch T J. The Arabidopsis abscisic acid response gene ABI5 encodes a basic leucine zipper transcription factor.[J]. Plant Cell, 2000, 12(4):599-609.
4楼2016-01-13 19:54:33
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