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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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紫玉涵轩

铜虫 (小有名气)

[求助] 添加IIs型酶切位点的引物怎样设计?

求助各位大神,我有一段3500bp的片段,想分成两段连接到载体上,但中间没有合适的酶切位点,所以想添加IIS型内切酶BsaI的酶切位点在片段外切割,但是我看到其切割位置是N,NNNN,那么请问我要怎样设计正向和反向引物?是否需要在自己的序列和酶切位点之间添加一个碱基用来切除掉?
第一个片段的反向引物为:C GGTCTC AGGAGAAACTAGCTTCTTAAAACCAGCCTGTAATCTACTAACACC
那么第二个片段的正向的引物应该是什么呢?
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