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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » SSR分子标记的pcr扩增产物跑电泳求助
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木易Vivi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 第五平原 at 2016-01-12 22:40:52
做胶的问题，你跑出来的条带歪歪扭扭的可能是两块玻璃板没放好，或者是固定的时候板子两端力度不一样就会这样。

好的，谢谢，我明天再试试

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11楼2016-01-13 00:02:27
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木易Vivi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小虫子666 at 2016-01-12 22:02:21
胶没有溶解完全还有细小颗粒，或者没有彻底凝固，电泳液及时更换，恒电压跑，自己考虑这几方面。
SSR引物扩增产物，若用琼脂糖电泳最好2%以上才能较好的区分多态性，其实跑SSR标记还是建议做非变性PAGE或者变性PAG ...

嗯。谢谢指导！想着先跑个琼脂糖电泳看有没有条带，回头再跑PAGE了

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12楼2016-01-13 00:04:12
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木易Vivi

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小虫子666 at 2016-01-12 22:02:21
胶没有溶解完全还有细小颗粒，或者没有彻底凝固，电泳液及时更换，恒电压跑，自己考虑这几方面。
SSR引物扩增产物，若用琼脂糖电泳最好2%以上才能较好的区分多态性，其实跑SSR标记还是建议做非变性PAGE或者变性PAG ...

补红花

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13楼2016-01-13 00:07:54
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yangyongjun

金虫 (小有名气)
胶都没摇匀，浓度不均一

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14楼2016-01-13 00:10:57
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xm-jf

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 木易Vivi at 2016-01-13 00:02:04
放了一个多小时呀
...

胶没做好吧！可以增加加热胶的时间，使胶充分溶解，再做胶，看看！
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15楼2016-01-13 08:53:31
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heianduck

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
跑成这样，跟胶本身的浓度以及电压都没有关系，相信你每个系列的条带都差不多，这只能是胶本身的问题。1、可能在溶胶的时候，胶已经快要凝固了，你才倒到制胶槽里。2、你在胶还没有干的时候，就拿出来用了。制胶的时候最好先戴手套碰碰胶，等它硬邦邦的时候，就差不多可以拿出来了。
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16楼2016-01-13 09:00:51
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seeker91

木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
琼脂糖胶吗？应该不会传这个问题呀，出现这个问题主要原因就是胶浓度太低，或者电泳过程中受热不均，冷却一下，电泳环境就ok，再或者就是电泳液时间久了，跟产物没关系。祝福祝福
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17楼2016-01-13 09:30:27
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彩果果

金虫 (著名写手)
不会是溶解琼脂糖的时候没融好吧，没有成透明状态

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低调！
18楼2016-01-13 10:37:12
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lzq_112233

金虫 (小有名气)
还是应该用SDS-Page胶，你做的普通琼脂糖胶，看样子是你电泳液没有抹过胶，或者电泳槽没有放水平

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19楼2016-01-13 11:26:29
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9192123

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
溶解琼脂胶的时候要确定都溶解完全并且混合均匀了。趁热倒到板子上， 板子放平整。彻底凉透后才开始电泳。
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20楼2016-01-13 14:20:39
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