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木易Vivi

新虫 (初入文坛)

[求助] SSR分子标记的pcr扩增产物跑电泳求助 已有9人参与

本人小白,刚开始做实验,根据设计的引物跑出来的pcr扩增产物。在跑电泳时电泳图总是歪歪的,已经连续好几次这样了,不晓得为什么?求万能的虫友指点迷津,基本上跑电泳出来的结果都是像下面的图片一样

SSR分子标记的pcr扩增产物跑电泳求助


SSR分子标记的pcr扩增产物跑电泳求助-1


SSR分子标记的pcr扩增产物跑电泳求助-2


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木易Vivi

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2楼: Originally posted by 蓝莓好吃吗87 at 2016-01-12 18:37:11
胶没制好吧

胶的问题吗?可是制胶都是同样的步骤,怎么会出现问题了?

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3楼2016-01-12 18:54:50
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木易Vivi

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5楼: Originally posted by upgo123 at 2016-01-12 21:31:47
请问你用的是什么胶?就是跑常规PCR产物用的胶吗?百分之多少的胶?电压和电流是多少呢?谢谢!

对啊,就是制的普通的,比例是1%,电压是150
V

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9楼2016-01-13 00:01:49
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木易Vivi

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8楼: Originally posted by 石磊1234vera at 2016-01-12 23:03:06
应该是胶没有做好,没有等琼脂变成透明的时候就拿出来了吧。

放了一个多小时呀

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10楼2016-01-13 00:02:04
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木易Vivi

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7楼: Originally posted by 第五平原 at 2016-01-12 22:40:52
做胶的问题,你跑出来的条带歪歪扭扭的可能是两块玻璃板没放好,或者是固定的时候板子两端力度不一样就会这样。

好的,谢谢,我明天再试试

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11楼2016-01-13 00:02:27
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木易Vivi

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6楼: Originally posted by 小虫子666 at 2016-01-12 22:02:21
胶没有溶解完全还有细小颗粒,或者没有彻底凝固,电泳液及时更换,恒电压跑,自己考虑这几方面。
SSR引物扩增产物,若用琼脂糖电泳最好2%以上才能较好的区分多态性,其实跑SSR标记还是建议做非变性PAGE或者变性PAG ...

嗯。谢谢指导!想着先跑个琼脂糖电泳看有没有条带,回头再跑PAGE了

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12楼2016-01-13 00:04:12
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木易Vivi

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6楼: Originally posted by 小虫子666 at 2016-01-12 22:02:21
胶没有溶解完全还有细小颗粒,或者没有彻底凝固,电泳液及时更换,恒电压跑,自己考虑这几方面。
SSR引物扩增产物,若用琼脂糖电泳最好2%以上才能较好的区分多态性,其实跑SSR标记还是建议做非变性PAGE或者变性PAG ...

补红花

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13楼2016-01-13 00:07:54
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