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jyxmwhc

铜虫 (小有名气)

[交流] 请高手解释基因组电泳图

电压200v;百分之0.8的琼脂糖凝胶;电泳时间是90分钟;提取方法是苯酚氯仿抽提法。
请指点:1、基因组电泳的条带前面为什么不齐的,前面为什么是圆弧状?
              2、条带后面为什么有拖尾现象

[ Last edited by jyxmwhc on 2008-10-1 at 00:12 ]
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jyxmwhc

铜虫 (小有名气)

首先谢谢楼上的两位朋友,再有我对这张电泳图在说明一下,图上最亮的带距离加样孔大概有1.8cm,电泳这么长时间RAN才跑1.8cm吗?DNA的浓度应该比较高,因为我在点样的时候感觉样品很粘稠。至于DNA纯度我没有测。

[ Last edited by jyxmwhc on 2008-10-1 at 09:14 ]
4楼2008-10-01 09:12:16
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tsingtao2008

木虫 (著名写手)

地球村村民

DNA降解严重(泳道有Smear,呈轨道状),下面亮的部分应是RNA。基因组DNA紧靠样品孔下方,显示纯度低,有蛋白质等杂质,亮度差,表明浓度低。
钱要流动,人要走动
2楼2008-10-01 06:25:52
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cat_kut

木虫 (小有名气)

我最近一直在做基因组的提取,有些心得跟你分享一下吧。 我同时选用过好几种方法进行抽提。做的时候尽量选用大枪头吸取移液,减少吹打次数。不管是哪种方法,我在pfge中的条带都是smear。不知道你后续工作要做什么,从你的电泳条件来看,我觉得该条件并不是很好的分离条件。大多数人会选用低压过夜分离。如果是想要看看大概size的话,加个marker会好些。如果是想直接做PCR的话,一般我都会直接用,不检测。
3楼2008-10-01 09:06:40
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jyxmwhc

铜虫 (小有名气)

3楼朋友:我是对这张图不理解,过去做的电泳图都很好,条带边缘都很整齐,没有smear,我后续工作是想PCR,担心扩不出来,所以检测了一下。
5楼2008-10-01 09:18:12
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