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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 虫草素结晶
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中主

新虫 (小有名气)

[求助] 虫草素结晶 已有1人参与

最近在做虫草素结晶，步骤参考了别人的，为啥文章里结晶很容易的样子？我结晶不出来
纯化步骤如下：
水提；75%醇沉；乙酸乙酯，氯仿萃取，去水层；调节pH为9，过DM130树脂；水洗，40%乙醇洗脱；浓缩，结晶
谢谢各位啦！！！
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1楼 2016-01-10 19:25:18
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czzlnkar

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
中主: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-01-12 19:04:17
有有机溶剂味正常，乙酸乙酯毕竟部分约10%溶于水的
还是觉得量不够，结晶比较勉强，最好直接旋干

发自小木虫IOS客户端
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中主
7楼2016-01-11 22:31:35
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czzlnkar

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
中间那段没看懂~其他的部分都好理解，就是EA和氯仿萃取是什么意思，虫草素不溶于低极性溶剂的，最佳溶剂就是水，所以这段没看懂，写明白点，略过的太多分析起来太费劲
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2楼2016-01-10 21:43:42
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中主

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by czzlnkar at 2016-01-10 21:43:42
中间那段没看懂~其他的部分都好理解，就是EA和氯仿萃取是什么意思，虫草素不溶于低极性溶剂的，最佳溶剂就是水，所以这段没看懂，写明白点，略过的太多分析起来太费劲

我看别人有这步，然后就试了试，估计是为了去掉一些色素吧。
水提样品之后，我用75%乙醇醇沉，去多糖和蛋白质，离心取上清；
我也有不用乙酸乙酯和氯仿做的，跳过这步，调节pH至9，上柱，在用pH=9的水洗，洗4个柱体积，再用pH=3,50%乙醇洗脱；浓缩结晶
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3楼2016-01-11 21:15:30
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czzlnkar

新虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 中主 at 2016-01-11 21:15:30
我看别人有这步，然后就试了试，估计是为了去掉一些色素吧。
水提样品之后，我用75%乙醇醇沉，去多糖和蛋白质，离心取上清；
我也有不用乙酸乙酯和氯仿做的，跳过这步，调节pH至9，上柱，在用pH=9的水洗，洗4个柱 ...

你那不是萃取，是洗涤吧，用乙酸乙酯和氯仿洗涤水溶液中其他成分~留下水溶液，这样确实说得通，过柱那部分也没有问题。
剩下2个问题我得质疑下~
（1）你取样量是多少，如果虫草素太少根本结晶不出来的，结晶是要一定量的，如果量少你就旋干重结晶吧
（2）醇沉之后的那个离心上清液建议你点板看看还有没有虫草素，个人怀疑虫草素在这里也会结晶~因为微溶于醇，这取决于溶液浓度
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4楼2016-01-11 21:32:45
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