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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNA电泳条带分析
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renyi2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 偶尔哼哼的猪 at 2016-01-12 15:14:19
反转录完了不可以通过跑胶来检测是否反转成功。因为直接反转的样品跑胶是没有清晰单一的条带的，是一片弥散状。通常可以设计扩增管家基因的引物（比如Actin）跑个PCR就好了。出来目的条带就说明反转成功了。
...

反转录完为什么是弥散条带呀?我今天用actin做了PCR，为什么条带很模糊，还有弥散

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21楼2016-01-12 23:10:02
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renyi2015

新虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by jinghun2004 at 2016-01-12 13:35:47
用Nanodrop(紫外分光光度计)定量，看260、230和260、280的比值，可以初步看出RNA质量如何。第一个样品上三分之二的量就足矣。
...

嗯嗯，好的，为什么反转录后直接跑胶没有条带，用actin做PCR条带模糊，有弥散呢

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22楼2016-01-12 23:10:58
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偶尔哼哼的猪

新虫 (小有名气)
引用回帖:
21楼: Originally posted by renyi2015 at 2016-01-12 23:10:02
反转录完为什么是弥散条带呀?我今天用actin做了PCR，为什么条带很模糊，还有弥散
...

条带模糊可能是PCR条件没设置好。比如退火温度什么的。或者你的RNA质量不够好也有可能造成这样的结果。good luck～

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23楼2016-01-12 23:12:04
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