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T4DNA连接酶 已有1人参与
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| T4 DNA ligase的最佳反应温度是16℃,可以连过夜,那么酶的作用时间大约为多长呢？反应体系放置几天后最初起作用连接酶也会失活吗？从而体系就没被连接上吗？请各位多多指教！！谢谢！！！ |
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原海亮
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【答案】应助回帖
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一般的酶制剂是会有一定活力上限的，通常负二十冻存可以保持活力，T4连接酶的使用，现在都有很多优化条件，比如我们现在用的22°连接，一般两小时，急得话半小时的也有用过，因为连接效率的问题关键在于片段和载体的处理上；另外关于时间后面的问题，T4 连接酶连接体系放久了，已连接的正常情况下是不会再被切开的，况且酶活力的体现和你连接体系的片段浓度也是有关的，就好像人就那么大力，你给他很少工作，他可以按时按量完成，超过他的能力后，可能那些多出来的工作他就没法完成，但是能力范围内的还是可以的 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-01-10 22:18:52
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