24小时热门版块排行榜    

查看: 3747  |  回复: 4

里里外外

新虫 (小有名气)

[求助] T4DNA连接酶 已有1人参与

T4 DNA ligase的最佳反应温度是16℃,可以连过夜,那么酶的作用时间大约为多长呢?反应体系放置几天后最初起作用连接酶也会失活吗?从而体系就没被连接上吗?请各位多多指教!!谢谢!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
里里外外: 金币+5, ★★★很有帮助 2016-03-29 11:51:45
一般的酶制剂是会有一定活力上限的,通常负二十冻存可以保持活力,T4连接酶的使用,现在都有很多优化条件,比如我们现在用的22°连接,一般两小时,急得话半小时的也有用过,因为连接效率的问题关键在于片段和载体的处理上;另外关于时间后面的问题,T4 连接酶连接体系放久了,已连接的正常情况下是不会再被切开的,况且酶活力的体现和你连接体系的片段浓度也是有关的,就好像人就那么大力,你给他很少工作,他可以按时按量完成,超过他的能力后,可能那些多出来的工作他就没法完成,但是能力范围内的还是可以的

发自小木虫Android客户端
天空才是极限,我有信心飞的更高!
2楼2016-01-10 22:18:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evil丶zero

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-10 22:18:52
一般的酶制剂是会有一定活力上限的,通常负二十冻存可以保持活力,T4连接酶的使用,现在都有很多优化条件,比如我们现在用的22°连接,一般两小时,急得话半小时的也有用过,因为连接效率的问题关键在于片段和载体的 ...

问一下你用的是哪一家的T4连接酶酶啊?
3楼2016-01-20 19:07:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

里里外外

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by evil丶zero at 2016-01-20 19:07:37
问一下你用的是哪一家的T4连接酶酶啊?...

生工的
4楼2016-03-29 11:52:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

廉翔

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原海亮 at 2016-01-10 22:18:52
一般的酶制剂是会有一定活力上限的,通常负二十冻存可以保持活力,T4连接酶的使用,现在都有很多优化条件,比如我们现在用的22°连接,一般两小时,急得话半小时的也有用过,因为连接效率的问题关键在于片段和载体的 ...

你好,想请教一下你用生工的T4,一般是做多少微升的反应体系,有计算成环率吗?
5楼2016-12-01 11:05:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 里里外外 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 04:51 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-16 03:26 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:14 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-16 02:02 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 20:47 by zNcEhTcH7ihq
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:23 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:11 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:15 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-15 15:14 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:49 by VMDqgnlKimtZ
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:22 by VMDqgnlKimtZ
[教师之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:26 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 08:14 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
请填处理意见