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1.加热,大部分蛋白质在温度超过60摄氏度以上会变性,沉淀.
2.盐析法沉淀:硫酸铵分级盐析法,蛋白质疏水集团暴露,沉淀.
3.等电点沉淀法:配置磷酸盐缓冲液,tris盐酸缓冲液等,当pH为等电点时,蛋白质沉淀.
4.有机溶剂:丙酮、乙醇、甲醇等。
5.表面活性剂,去垢剂等:SDS,Tween 100,Span 85等.
6.变性剂:盐酸胍等
个人觉得如果进液相的话,有机溶剂沉淀法比较靠谱。通常首选能和水混溶的有机溶剂,使用较多的有机溶剂是乙醇、甲醇、丙酮,还有二甲基甲酰胺、二甲基亚砜和乙腈等。 |
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