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千寻回眸

铁杆木虫 (正式写手)

研究生

[求助] 手性多肽关于使用手性高效液相色谱分离的问题,急求啊! 已有1人参与

最近合成出两个对应异构体,R和S的,是一个多肽,分子量六千,极性很大,需要用反相手性柱来分离,但是手性柱有好多,我该选择哪一种啊?有人说分子量太多,即使是手性柱,也未必能分开,是这样吗?
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
那么大的分子难用手性柱分。分离多肽和蛋白质通常需要特殊的大孔径固定相。普通HPLC柱固定相孔径在100A附近,蛋白柱固定相孔径在300A附近。孔径小了分子可能根本进不去,表现出来就是保留时间短,分不开。

另外那么大的肽你是怎么合成对映异构体的?如果每一个氨基酸都用非天然异构体的话倒是可能。但这种情况下如果每个非天然氨基酸的光学纯度为99%,而且合成过程当中没有消旋,50肽接下来你要的东西也仅有60%的光学纯度。这时候再分析光学纯度还有没有意义?另外你能确保多肽的折叠完全一样吗?

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2楼2016-01-07 15:58:24
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千寻回眸

铁杆木虫 (正式写手)

研究生

我测过旋光度和圆二色,基本是正负相反的。可不可以说明它们是很好的对应异构体呀
坚持自己的梦想永不放弃!
3楼2016-01-07 22:02:33
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