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[求助]
使用氯化苄法提取DNA的若干问题
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求助，我想用氯化苄法提取真菌里的dna，但是提到加异丙醇产生絮状沉淀这一步时我个人觉得没有沉淀产生， 1.请问絮状沉淀是什么颜色的？是肉眼可见的吗？我做的就是分了层，下层是像油一样的介质，但没有看到沉淀，请问这是不是压根就没提出来呢？因为电泳检测也没有。 2.我们最后加的是提细菌dna试剂盒里的C6试剂，是不是只能加TE啊 谢谢大家 发自小木虫IOS客户端 |
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Why not using the CTAB Method? 3% CTAB DNA extraction protocol http://www.zoology.ubc.ca/~riese ... n-protocol-v1.2.pdf |
2楼2016-01-07 12:01:55
3楼2016-01-08 14:00:48
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Your DNA samples are rich in sticky compounds. You should wash the homogenate with CTAB-free buffer for three or four times, until the supernatant is not viscous. Please refer to this article "Zeng J, Zou Y P, Bai J Y, et al. Preparation of total DNA from ‘recalcitrant plant taxa’[J]. Acta Botanica Sinica, 2002, 44(6): 694-697." "The DNA is in a tight tangle with polysaccharides. This tangle of DNA and polysaccharides is very difficult to separte, which has make them too sticking to be dissolved in water or TE, and it is not even possible to load such DNA samples into the electrophoresis well. " Therefore, your protocol is not suitable for the plant total DNA extraction. Give you a advise, use the 3% CTAB DNA extraction protocol instead. |
4楼2016-01-08 15:14:02
