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1989_quxin

金虫 (初入文坛)

[求助] QPCR 熔解曲线不单一,是引物二聚体还是污染啊?求分析

QPCR 熔解曲线不单一,是引物二聚体还是污染啊?求分析
不同的曲线是 标曲里的不同浓度,其中黄色和绿色是空白(不加模板),可见不加模板或者模板浓度越低 杂峰越大,这到底是引物污染啊,还是引物二聚体。
体系(25uL):5uL 模板 + 0.75uL F 引物(浓度10uM/uL)+ 0.75uL R 引物+6 uL depc水+12.5uL SYBR green

QPCR 熔解曲线不单一,是引物二聚体还是污染啊?求分析
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QPCR 熔解曲线不单一,是引物二聚体还是污染啊?求分析-1
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1989_quxin

金虫 (初入文坛)

P1: TTCCGCATCAAAGCCAGGTCTATTC
P2: TCAGAAGAAGCCATCAGCAACTCATC
2楼2016-01-05 19:56:22
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andywang6137

木虫 (著名写手)

问题解决了吗》?感觉你的NTC,溶解曲线Tm<80的应该是引物二聚体,但后面和目的基因一致(Tm值 85)的是目的产物。你这个怎么控制或解除的?我的NTC一直有目的扩增。
3楼2016-09-05 10:25:19
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