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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何提高手提土壤DNA的纯度
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谜雾xiaoxiao

木虫 (小有名气)

环境微生物苦逼研究生

[求助] 如何提高手提土壤DNA的纯度 已有2人参与

我做的样品是是湿地土壤，提取DNA后，纯度（260/280）在1.3-1.6之间，浓度很高，想要求助一种能够提高DNA纯度的方法，或者好的提取方法，希望可以把纯度提高到1.8-2.0，求指教！
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1楼 2016-01-05 19:16:25
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反应链

新虫 (正式写手)
You could try this protocol, which is very useful for plant total DNA extraction.

I hope you could improve the CTAB method for Soil microorganism total DNA extraction by drawing lessons from this protocol.

3% CTAB DNA extracion protocol
(modified from Zeng et al. 2002, ACta Botanica Sinica 44; 694-697)

1. washing out polysaccharides with CTAB-free buffer from homogenate.
2. increasing the percentage of CTAB in extraction medium.
3. using high concentration salts pior to DNA precipitation with isopanol.

如何提高手提土壤DNA的纯度
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2楼2016-01-05 21:31:38
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xiaoqiao_mao

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
谜雾xiaoxiao: 金币+10, ★有帮助 2016-01-06 14:51:48
MP FastDNA for soil 试剂盒，我们实验室一直用这个，效果很好，也提过湿地的DNA。你可以试一下。
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3楼2016-01-06 14:36:27
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谜雾xiaoxiao

木虫 (小有名气)

环境微生物苦逼研究生
引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2016-01-05 21:31:38
You could try this protocol, which is very useful for plant total DNA extraction.

I hope you could improve the CTAB method for Soil microorganism total DNA extraction by drawing lessons from this  ...

Thank you ,i will give it a try
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4楼2016-01-06 14:50:51
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谜雾xiaoxiao

木虫 (小有名气)

环境微生物苦逼研究生
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaoqiao_mao at 2016-01-06 14:36:27
MP FastDNA for soil 试剂盒，我们实验室一直用这个，效果很好，也提过湿地的DNA。你可以试一下。

试剂盒我们也用，但是这一次的样品较多，希望可以找到一个手提的方法
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5楼2016-01-06 14:51:22
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谜雾xiaoxiao

木虫 (小有名气)

环境微生物苦逼研究生
希望有人能推荐比较好的手提土壤DNA的方法
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6楼2016-01-18 09:47:26
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
谜雾xiaoxiao: 金币+5, ★有帮助 2016-01-18 10:54:53
用mp或者qiagen的试剂盒肯定可以提好。沙土我都提出来1.7

发自小木虫IOS客户端
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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
7楼2016-01-18 10:24:44
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谜雾xiaoxiao

木虫 (小有名气)

环境微生物苦逼研究生
引用回帖:
7楼: Originally posted by 416114799 at 2016-01-18 10:24:44
用mp或者qiagen的试剂盒肯定可以提好。沙土我都提出来1.7

我们也用MoBio的试剂盒提取土壤DNA，效果也很好，纯度都在1.9以上，现在我们老板想提高手提的质量，希望用手提的方法也能提高纯度。
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8楼2016-01-18 10:48:46
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14052004

新虫 (初入文坛)
操作过程严格按照试剂盒来，多做几次实验就找到问题所在了

发自小木虫Android客户端
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9楼2018-01-17 18:56:42
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冰尘子

铁虫 (初入文坛)
小冀-: 屏蔽内容, 请调整心态，规范回帖，谢谢 2018-01-18 15:19:04
本帖内容被屏蔽
10楼2018-01-18 15:00:38
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