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chenmimi

新虫 (正式写手)

[求助] 用C18色谱柱为什么分不开乳酸与乙酸?换了好多流动相,还是没分开,求指教。 已有8人参与

根据国标:流动相:乙腈与0.1%磷酸2.5:97.5(v:v)
                C18色谱柱  150x4.6x5nm
               波长:210nm
                 曾换了好多流动相结果发现分离效果不好,所以就参考国标做一下,结果还是分不开。不知是C18柱分不开有机酸的原因还是流动相没选好的原因?我用的色谱只有一个泵,不能梯度洗脱。第一次做,也不懂。发此贴,希望向你们请教请教。
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

在Research Gate上看到一个类似问题,有人给出的答案是向流动相中加高浓度盐,NaCl或磷酸盐。你可以试试。

另外可以向流动相加季铵盐,用离子对的方法增加保留时间。不过这只能作为万不得已的办法,因为一旦用过离子对试剂柱子就很难完全洗干净,别人会骂死你的。

发自小木虫Android客户端
28楼2016-01-07 04:47:39
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liuxiao5201

新虫 (小有名气)

2楼2016-01-05 15:23:30
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chenmimi

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liuxiao5201 at 2016-01-05 15:23:30
柱子有没有问题?

我也不知道,我做标准曲线时,主峰前面都会有倒峰。我反应产物都是有机酸,乳酸与乙酸单独进样保留时间很近。也不知接下来该如何做?
3楼2016-01-05 15:30:38
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liuxiao5201

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chenmimi at 2016-01-05 15:30:38
我也不知道,我做标准曲线时,主峰前面都会有倒峰。我反应产物都是有机酸,乳酸与乙酸单独进样保留时间很近。也不知接下来该如何做?...

你预运行了吗?基线走得怎么样?

发自小木虫Android客户端
4楼2016-01-05 15:32:28
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